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ckk1987

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分子生化实验经验积累

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1楼 2013-04-09 18:33:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-04-10 08:49:51
做了内参基因，我知道需要定量，但实验室没有这个条件，差不多100ng吧！...

100ng总RNA不算多，一般逆转录可以做1μg。逆转录完成后稀释5-10倍，用1μl做PCR模板。
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7楼2013-04-10 14:34:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ckk1987(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-10 08:46:56
ckk1987: 金币+1 2013-04-10 08:55:41
ckk1987: 金币+1 2013-04-10 12:22:06
你后面的PCR体系是25μl, 10×buffer怎么是5ul?
有没有做证对照（P内参基因）？此外，反转录时候的RNA需要定量，因为反应中RNA太多或者太少都会影响逆转录的效果。你说的估算，是在逆转录的时候加了大致多少μg的RNA呢？
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2楼2013-04-10 02:26:57
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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3楼2013-04-10 08:44:20
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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4楼2013-04-10 08:49:51
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