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alice

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 5487.5
红花: 1
帖子: 617
在线: 112.3小时
虫号: 1206521
注册: 2011-02-19
专业: 色谱分析

[求助] 重叠PCR引物，两个片段分别回收后存在杂带是怎么回事

如题，我设计了重叠PCR的引物，在分别PCR两个片段后，胶回收，PCR产物没有或只有少量杂带，可是胶回收后杂带更明显，也不一定是PCR产物中存在的杂带，哪位同学知道是怎么回事？？？
PS:已经重复做过好多次，结果都是一样的，求解释和解决的办法！！！

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To be strong enough

1楼2013-04-01 21:33:01

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qqxs

木虫 (正式写手)

应助: 61 (初中生)
金币: 3933.3
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专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
alice: 金币+1, ★有帮助, 应该不是试剂盒的问题，我们做其他的是没问题的，而且我们电压已经用到了很低，跑了一个多小时，杂带比目的条带要大差不多一半…… 2013-04-04 13:41:40

建议胶回收的时候跑的慢一点，电压小一点，尽量把条带跑锐利了，如果是小片段，最好用高浓度胶，跑长一点，切胶时才能去除杂带。再者，你胶回收后的杂带是比目的条带小吗？会不会试剂盒的东西有DNase污染？

4楼2013-04-03 12:15:09

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