| 查看: 1936 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
kueradi金虫 (小有名气)
|
[求助]
质粒提取问题
|
|
|
质粒p-EGFP-C3,DH5a菌。一直用碧云天的小量抽提质粒试剂盒，去年都挺好的，200-300ng/ul.今年再提就一直可低了，30-40ng/ul,运气好60-90ng/ul. A260/A280也不到1.7.买了新的盒子还是这样。质粒重新转化，抽提还是这样。大家有没有遇到过这种情况呀，什么原因呀呀。着急呀。 菌液都是过夜摇菌，12h. 每次4ml合一管提。沉积的菌量还合适着。操作都可注意了。急呀，什么原因呀。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有279人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Fosmid质粒提取问题
已经有7人回复
- 如何提高PET-28a质粒提取浓度？
已经有13人回复
- 目的基因连接到克隆载体后提取质粒测序，序列有问题
已经有11人回复
- 大提质粒遇到的问题
已经有10人回复
- 质粒提取后出现两条亮度相同的带，谁帮我看一下。。。。。。。
已经有6人回复
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 关于甘油菌复苏及提质粒两个问题求助
已经有11人回复
- 新手求助——质粒电泳条带问题
已经有15人回复
- 质粒转染成功后质粒小提出现了问题
已经有4人回复
- 提质粒遇到问题
已经有13人回复
- 提不出质粒，不知道出了什么问题，求助……
已经有17人回复
- 质粒提取琼脂糖电泳的3个条带，到底每条是什么？
已经有15人回复
- 有人提取过PET-28a的质粒吗？
已经有18人回复
- 质粒提取
已经有22人回复
- 酵母质粒转化及提取验证问题求助
已经有12人回复
- 质粒片段丢失问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】质粒提取的杂质去除问题
已经有14人回复
yesali
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2168.6
- 沙发: 1
- 帖子: 643
- 在线: 127.4小时
- 虫号: 2233223
- 注册: 2013-01-10
- 专业: 植物遗传学
3楼2013-04-01 15:01:08
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
2楼2013-04-01 14:49:42
bingdong05
银虫 (正式写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 173.6
- 散金: 174
- 帖子: 559
- 在线: 158.8小时
- 虫号: 281641
- 注册: 2006-09-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-04-01 15:07:36
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流，节日愉快 2013-04-01 15:57:40
kueradi: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-10 10:16:21
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流，节日愉快 2013-04-01 15:57:40
kueradi: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-10 10:16:21
| 一般试剂盒提质粒效果都很好的，还是以菌为主排除因素。首先，菌液过一两个月后不要直接摇菌，最好是划平板活化，挑取单克隆摇菌，菌的活性高。其次，以经验来说摇菌15个小时比较好，提取的质粒浓度能高。再次，你质粒重新转化所用的质粒浓度怎么样？一般质粒转化出来得菌都是很好的，检查下抗生素是否加的有点多，加多会影响菌的生长，摇菌提质粒结果不好。最后，实在不行就换试剂盒呗 |
5楼2013-04-01 15:44:45
30