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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA的电泳图
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林晓竹110

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA的电泳图

黑体
为什么用CTAB法提的DNA两次电泳图不一样的呢

DNA2013-3-28.jpg



DNA  .jpg
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好好奋斗实验那
1楼 2013-03-31 16:14:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jk_xdx

银虫 (小有名气)

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★
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林晓竹110(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:05:39
你后来提的那个RNA比较多啊……
第一次提的也有，不过比较少。
建议DNaseI处理下。
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2楼2013-03-31 22:36:41
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:05:50
首先我不知道你为什么要跑DNA呢？ 如果用于PCR，我觉得没有必要跑电泳。另外在提完的DNA用水溶液溶解的时候，可以叫一些RNA酶去除一些RNA。
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天道酬勤
5楼2013-04-01 07:13:13
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牧歌ping

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-04-01 16:04:19
CTAB法提取DNA算是好提吧，溶解后黏糊糊的像胶水一样，一般是稀释十倍再做后续实验。提取DNA的时候忌剧烈震荡，否则DNA会断裂不完整。你第一张DNA很好，明显没有杂带；第二张DNA浓度都不高，反而RNA很亮，前沿也很亮，估计是DNA振断了。
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10楼2013-04-01 16:00:33
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tssy77

木虫 (知名作家)
第一张图是最后跑的胶图是吧，应该没问题，能用
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平常心
11楼2013-04-01 18:27:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:06:03
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:07:37
引用回帖:
9楼: Originally posted by 林晓竹110 at 2013-04-01 12:31:26
看来还是用用RNA酶处理的啊 呵呵...

如果你要的是纯的DNA，是应该用RNase处理一下。不过，如果你只是用来做PCR的模板，RNA混在里面也无所谓的。
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12楼2013-04-01 23:29:16
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Leo_xin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jk_xdx at 2013-03-31 22:36:41
你后来提的那个RNA比较多啊……
第一次提的也有，不过比较少。
建议DNaseI处理下。

人家好像是抽DNA吧，。。。
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还有太多地方值得改进。
13楼2013-04-02 01:13:55
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Leo_xin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-01 00:39:31
第二次的RNA提得不错，就是有DNA污染，用DNase处理一下就可以了。

人家要的是 DNA，。。。。貌似
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还有太多地方值得改进。
14楼2013-04-02 01:14:31
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:06:15
gyesang: 回帖置顶 2013-05-31 23:06:17
引用回帖:
5楼: Originally posted by wchuangqi at 2013-04-01 07:13:13
首先我不知道你为什么要跑DNA呢？ 如果用于PCR，我觉得没有必要跑电泳。另外在提完的DNA用水溶液溶解的时候，可以叫一些RNA酶去除一些RNA。

如果只是确定有没有提出来DNA，完全没有必要跑电泳。你可以拿一个其他已知能扩出条带的引物作为PCR阳性对照。如果你的条带仍然不能扩出来，要仔细Blast你的引物是否特异。如果不特异，可以考虑换引物。如果你的CTAB是别人用的可以做出来的，那么我确定你最后的DNA没有问题，没有必要跑电泳。但是如果你的CTAB是你自己配的新的，那么就用其他引物作为阳性对照。
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天道酬勤
15楼2013-04-02 01:32:47
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duanepp

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:06:47
可以加一些RNase处理一下，这样就可以了
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16楼2013-04-02 08:00:59
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晓学究

木虫 (著名写手)

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★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:06:52
总体来看，第二次提的效果要远好于第一次。在提DNA 的过程中能提出那么好的RNA真的不容易，如果你要的是DNA，那就拿RNase处理。反之，那就拿Dnase处理。
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锻炼，饮食，计划，幸福
17楼2013-04-02 08:26:51
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛

【答案】应助回帖

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你的操作很神，提DNA竟然把RNA提的有模有样。
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但愿人长久
18楼2013-04-02 08:45:34
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wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:07:08
第一张图跑胶时间长，RNA有可能会降解，但不至于降解完，不过DNA可以用。第二张图RNA比较多，加RNAase就行了。另外做PCR时，DNA模板加50ng就足够了，太多了反而不好！
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19楼2013-04-02 09:12:31
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:07:15
第二次的RNA提得不错，就是有DNA污染，用DNase处理一下就可以了。
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3楼2013-04-01 00:39:31
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jjg0912

木虫 (正式写手)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:07:22
总体来看，第二次提的效果要远好于第一次。在提DNA 的过程中能提出那么好的RNA真的不容易，如果你要的是DNA，那就拿RNase处理。反之，那就拿Dnase处理。
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4楼2013-04-01 06:19:04
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林晓竹110

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wchuangqi at 2013-04-01 07:13:13
首先我不知道你为什么要跑DNA呢？ 如果用于PCR，我觉得没有必要跑电泳。另外在提完的DNA用水溶液溶解的时候，可以叫一些RNA酶去除一些RNA。

因为不确定自己提DAN有没有提出来 泡个电泳就能确定自己有没有提出来的啦  RNA酶有考虑加的  但是实验室人说加也没什么影响的啊 所以就没加的
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好好奋斗实验那
6楼2013-04-01 12:27:10
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林晓竹110

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jjg0912 at 2013-04-01 06:19:04
总体来看，第二次提的效果要远好于第一次。在提DNA 的过程中能提出那么好的RNA真的不容易，如果你要的是DNA，那就拿RNase处理。反之，那就拿Dnase处理。

其实我这是一次提的  只是两次跑电泳的  第一张胶图是第二次跑电泳的结果 第二章是第一次跑的电泳图  第一次跑电泳忘记几下序号了的 所以又跑了一次 结果相差很大的啊 很费解的呢
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好好奋斗实验那
7楼2013-04-01 12:29:35
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林晓竹110

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jk_xdx at 2013-03-31 22:36:41
你后来提的那个RNA比较多啊……
第一次提的也有，不过比较少。
建议DNaseI处理下。

其实两张图的DNA都是一次提的 只是我忘记记下序号 又跑了一次的
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好好奋斗实验那
8楼2013-04-01 12:30:47
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林晓竹110

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-01 00:39:31
第二次的RNA提得不错，就是有DNA污染，用DNase处理一下就可以了。

看来还是用用RNA酶处理的啊 呵呵
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好好奋斗实验那
9楼2013-04-01 12:31:26
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