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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酿酒酵母转化问题
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者Trista`将赠送您 50 个金币

Trista`

铜虫 (小有名气)

[求助] 酿酒酵母转化问题已有1人参与

如题，做了2个月的酿酒酵母化转，效率极其低啊，用的URA缺陷型培养基筛选，找到不原因啊
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结交优秀的人
1楼2013-03-27 11:05:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shel0451

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不会呀，个人感觉醋酸锂转化效率挺高的。你是用质粒转还是PCR产物呢？
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Trista`
难得糊涂
8楼2013-03-29 06:24:39
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普通回帖

Rio2016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-03-29 09:39:59
从转化条件、步骤方面分析，

转化因子是否设计成功、
有没有融合到宿主染色体上、流产转化等

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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Trista`
寥寥数年、将就过活
2楼2013-03-27 12:14:29
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tianchi2952

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-03-29 09:40:05
筛选是件很费工夫的事情，耐心哈....可以试一下别的办法....
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Trista`
益学善用
3楼2013-03-27 12:38:18
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Trista`

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Rio2016 at 2013-03-27 12:14:29
从转化条件、步骤方面分析，

转化因子是否设计成功、
有没有融合到宿主染色体上、流产转化等

想问下  您做过醋酸锂转化吗？  我看了下转化体系 是按照文献上来的啊 。。也是按着步骤来的。。。。完全不知道为什么啊  。。。有木有什么微生物扣扣群啊 ？ :tuzi3
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结交优秀的人
4楼2013-03-27 15:44:18
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Rio2016

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-03-29 09:40:16
我没做过这方面东西。
文献上的数据方法有时不准、这是确定的。
看看你们实验室自己建立的方法。
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寥寥数年、将就过活
5楼2013-03-27 16:30:27
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Trista`

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by tianchi2952 at 2013-03-27 12:38:18
筛选是件很费工夫的事情，耐心哈....可以试一下别的办法....

请问，您做过这方面的实验吗？
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结交优秀的人
6楼2013-03-27 16:46:09
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tianchi2952

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Trista` at 2013-03-27 15:44:18
想问下  您做过醋酸锂转化吗？  我看了下转化体系 是按照文献上来的啊 。。也是按着步骤来的。。。。完全不知道为什么啊  。。。有木有什么微生物扣扣群啊 ？ :tuzi3...

国产文献貌似不怎么可靠，找一下外文文献吧......
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益学善用
7楼2013-03-28 11:34:22
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Trista`

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by shel0451 at 2013-03-29 06:24:39
不会呀，个人感觉醋酸锂转化效率挺高的。你是用质粒转还是PCR产物呢？

我现在觉得 会不会是ssDNA的问题  ，想问下 鲱鱼精DNA （D3159，sigma)  与 鲑鱼精DNA （D1626,sigma) 有什么区别？ 实验室买的是鲱鱼精的，这个会不会对转化有影响呢？ 谢谢
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结交优秀的人
9楼2013-03-30 10:02:57
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Trista`

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by tianchi2952 at 2013-03-28 11:34:22
国产文献貌似不怎么可靠，找一下外文文献吧.........

哎。。。想下的文献 下不了，比如这篇 High-efficiency yeast transformation using the LiAc/SS carrier DNA/PEG method。。。。
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结交优秀的人
10楼2013-03-30 10:04:27
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