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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ssDNA如何进行PCR？
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malstose

金虫 (正式写手)

[求助] ssDNA如何进行PCR？

弱弱地问一句，ssDNA如何进行PCR扩增，它不是单链吗，如何形成双链DNA继而开始PCR呢？
多谢啦！
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1楼 2013-03-23 16:12:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by malstose at 2013-03-27 12:40:15
PCR扩增不是需要两条链（+/-链）吗，刚开始我不是太明白对ssDNA病毒来说扩增所需的第二条链是如何来的，现在明白了，呵呵，感谢！...

PCR的时候模板是一条链。ssDNA也是会发生反应的。因为你有两个引物，所以会对引物之间的序列特异性大量扩增。我认为你在纠结一个PCR原理的问题，有时间自己看看PCR原理的书就可以明白的。
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9楼2013-03-27 14:32:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR时候的模板是是变性解链了的，也就是ssDNA，然后和引物anealing。所以不明白你为什么要这么问？
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2楼2013-03-23 16:46:12
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malstose

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-23 16:46:12
PCR时候的模板是是变性解链了的，也就是ssDNA，然后和引物anealing。所以不明白你为什么要这么问？

谢谢，我的意思是，在PCR扩增ssDNA病毒时候，ssDNA的另外一条互补链是在何时形成的？
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3楼2013-03-24 18:48:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by malstose at 2013-03-24 18:48:17
谢谢，我的意思是，在PCR扩增ssDNA病毒时候，ssDNA的另外一条互补链是在何时形成的？...

第一个循环的时候只有和ssDNA配对的引物扩增出模板的互补链。后面的循环就和用dsDNA做模板的PCR一样了。
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4楼2013-03-25 05:32:58
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