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哆啦B梦1024

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[求助] 我可以过镍柱了吗？

正在做的一个酶，加组氨酸标签以后用IPTG诱导基本都形成了包涵体，后来改用乳糖诱导，有部分蛋白可溶了，ee值最高大概38%，我想把有可溶性蛋白的细胞破碎上清液过一下镍柱，能纯化出来的蛋白可能会比较少，但觉得毕竟能纯化出来一些了。大家觉得这么做靠谱不？一定要大部分蛋白都可溶了才可以过镍柱吗？谢谢大家了！

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1楼 2013-03-20 21:52:25

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可以上柱的。用菌做大量表达很容易获得足够的菌和蛋白量，只要可溶蛋白占一定比例就可以了。你可以根据可溶蛋白比例大致估算需要养多少菌做纯化。

2楼2013-03-21 05:12:33

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哆啦B梦1024

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谢谢你啊！下周我会这么试一下的~

3楼2013-03-22 21:49:07

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