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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白电泳相关问题求教

求教各位大神,我现在正在做蛋白电泳(SDS-PAGE),我现在遇到的问题是电泳能跑出带,但是整个带都往下移,Maker都跑下去了,感觉就是胶的上半部分根本没有带,不知道这是什么原因?是哪个试剂出现问题了?还是我设定的电压电流出现问题。我现在是前30分钟设定电压80V,电流60mA ,半小时后电压120V,电流60mA.请给位大侠指点一二。
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linzshit

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个我以前经常遇到,试剂什么的基本都没有问题,它就是有一条离子带压着你的条带一直向下,使你的胶面上什么都剩不下,最终的解决途径是换一个小板跑,效果就好很多。我自己分析了下原因,配SDS-PAGE理论上需要在无氧的环境下进行,这样才能保证交联,如果玻璃板太大,其中包含的空气比较多,不利于凝胶。
以上是个人经验,希望能帮助到你
9楼2013-03-20 12:36:55
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ganfucell

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑过了吧 时间缩短一点 不知道你跑了多长时间 一般浓缩胶连分离胶 100V 4.5h 即可
理想爱情事业
2楼2013-03-19 21:50:23
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zysfjqz

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是跑过了,减小电压电流时间等都可以解决问题啊。而且还有指示剂可以判断是不是跑过了丫。。。
3楼2013-03-19 22:12:48
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当下的距离

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是跑过了吧,减小电压电流时间等都可以解决问题啊。而且还有指示剂可以判断是不是跑过了丫。。。
youcangetwhatyouwantifyouwantitenough.
4楼2013-03-20 00:59:25
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