24小时热门版块排行榜

返回列表

叶子落地了

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 10
帖子: 3
在线: 12.9小时
虫号: 2171067
注册: 2012-12-06
专业: 生物化学

[求助] 酵母质粒转化大肠杆菌

酵母质粒转化大肠杆菌的步骤是什么啊，谢谢啦

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

目的片段+pPIC9K载体转化大肠杆菌DH5a后提取质粒失败已经有13人回复
质粒导入大肠杆菌导不进去，求高手指点已经有16人回复
质粒转化完后怎么做已经有6人回复
本来带有质粒的大肠杆菌再对它进行一次质粒转化能达到增加质粒拷贝数的目的吗？已经有10人回复
质粒转化完传代后发现变小再传一代质粒直接消失了已经有14人回复
如何把质粒转入大肠杆菌中？已经有13人回复
求助一个关于酿酒酵母转化的问题已经有19人回复
质粒转化到大肠杆菌野生菌中验证遇到的非常非常怪的问题已经有3人回复
9k表达质粒电转化km71 已经有8人回复
酵母质粒转化及提取验证问题求助已经有12人回复
啤酒酵母质粒转化求助已经有7人回复
【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一已经有16人回复
【求助/交流】分离酵母质粒已经有12人回复
【求助/交流】质粒转化枯草杆菌感受态原理已经有4人回复
【求助/交流】大肠杆菌，农杆菌质粒已经有11人回复
【求助/交流】酿酒酵母质粒转化大肠杆菌已经有11人回复
【求助/交流】酵母质粒提取已经有4人回复
【求助/交流】为什么质粒转化后晒出的菌在原培养基上长不出已经有5人回复

1楼 2013-03-19 10:51:41

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

卢尔夏

铁虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 2.5
散金: 10
帖子: 18
在线: 10.1小时
虫号: 1426494
注册: 2011-10-03
专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-19 12:55:14

首先把你克隆好的基因连接到载体上，如果是空载体的话这一步忽略；其次，按一定比例混合载体和大肠杆菌感受态(我实验室常用的是10μL质粒+30μL感受态，要是感受态不浓的话可以多加点)，冰上放置30min；30min结束后42℃热激90s，迅速（注意要快）取出在冰上放置5min；加入1mL LB培养基（无抗生素），37度摇床200转/分钟摇45分钟；4000转离心2min，去掉800μL上清，取下层200μL涂板

赞一下

回复此楼

2楼2013-03-19 11:03:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主叶子落地了的主题更新

返回列表