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叶子落地了

新虫 (初入文坛)

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[求助] 酵母质粒转化大肠杆菌

酵母质粒转化大肠杆菌的步骤是什么啊，谢谢啦

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1楼 2013-03-19 10:51:41

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卢尔夏

铁虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-19 12:55:14

首先把你克隆好的基因连接到载体上，如果是空载体的话这一步忽略；其次，按一定比例混合载体和大肠杆菌感受态(我实验室常用的是10μL质粒+30μL感受态，要是感受态不浓的话可以多加点)，冰上放置30min；30min结束后42℃热激90s，迅速（注意要快）取出在冰上放置5min；加入1mL LB培养基（无抗生素），37度摇床200转/分钟摇45分钟；4000转离心2min，去掉800μL上清，取下层200μL涂板

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2楼2013-03-19 11:03:40

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