24小时热门版块排行榜    

查看: 368  |  回复: 2

su5five

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助基因克隆指导!

各位高手:
         我是一个新手,现在有一个基因需要克隆,目前的状况是:这个基因在我需要克隆物种的同源性相近的物种上面已经克隆出来。我只需要这个基因的部分DNA序列,请问我该怎样操作?用什么样的方法?实验需要哪些药品?越详细越好!万分感谢!金币有限。。。
      

       toll样受体基因 实验对象虾!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peakg7

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你这是有什么特殊需要,设计一对引物把你要的序列p出来不就可以了么?
2楼2013-02-26 16:50:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangcaijuan

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先你应该问问同门师兄姐,你们实验室用的基因克隆是什么手段。不同方法步骤是完全不一样的。我也是个新手,我先把我用过的gateway方法的步骤说一下吧。
1,先决定需要的目的片段,然后在上下游设计含attB-位点的引物。
2,PCR扩增目的片段并电泳割胶回收提纯目的基因。
3,BP反应将目的基因转入载体质粒,转化大肠杆菌。
4,筛选阳性克隆,先电泳比对质粒大小,然后测序确定目的基因是否正确插入质粒载体。
5,再进行LR反应,将目的基因转入Destinationz质粒载体,同样筛选阳性克隆,测序确定基因是否正确。
3楼2013-02-26 18:29:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 su5five 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见