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关于DNA连接的问题
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关于DNA连接的问题
现在有两段约23bp的双链DNA片段,要把他们连接成一段约60bp的双链DNA,应该用什么方法,各种试剂使用多少的量?连接完以后用什么方法纯化一下,然后要和质粒载体连接? 非常感谢
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1楼
2013-01-25 20:28:58
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4楼
:
Originally posted by
WilliamHJ
at 2013-01-26 14:04:28
两段合起来才60bp,那不如直接去合成好了,当成引物合成的话,一个bp才一块多。。
谢谢,不过已经合成好了,只能这样做了
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5楼
2013-01-26 16:47:20
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2013-01-27 13:04:42
用PCR连起来 你现在序列没有重叠部分的话 重新订引物吧。
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2楼
2013-01-25 22:15:36
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Haibara_Ai
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也可以设计两段包含目标序列的长引物,在末端放BsaI酶切位点,直接PCR载体后, 酶切连接
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3楼
2013-01-25 22:19:07
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WilliamHJ
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
两段合起来才60bp,那不如直接去合成好了,当成引物合成的话,一个bp才一块多。。
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4楼
2013-01-26 14:04:28
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