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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 【求助】巯基dna与纳米金的连接问题
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ht300

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】巯基dna与纳米金的连接问题

在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下
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1楼2011-03-07 16:24:46
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ssyyll1019

铜虫 (小有名气)
★ ★
ht300(金币+1):谢谢参与
americanyk(金币+1): tks 2011-03-09 01:37:04
ht300(金币+1): 2011-05-19 09:38:11
引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-03-07 16:24:46:
在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下

要么是你的DNA 没有连接上或是连接量不够的。
在修饰巯基DNA 是你可以试着在胶体金溶液里加入一定量的非离子表面活性剂，这样胶体金就对盐离子有一定的抗性，防止胶体金的团聚，而且在老化的时候，增加盐离子的浓度，从而增加DNA的连接量！
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2楼2011-03-08 16:15:00
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fanger

银虫 (小有名气)
★ ★
ht300(金币+1):谢谢参与
yusen_1982(金币+1): 欢迎讨论！ 2011-05-03 22:05:38
ht300(金币+1): 2011-05-19 09:38:06
那是金纳米团聚了！盐度太大！在保证金不足量时，盐度增加的速度太快，可选择多次少量的加盐！因为金纳米对盐很敏感
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3楼2011-05-03 17:30:08
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yuguanggui

至尊木虫 (知名作家)
★
ht300(金币+1):谢谢参与
ht300(金币+1): 2011-05-19 09:38:00
除了上述离子强度的影响外
PH值的作用也是比较大的
巯基DNA的加入有可能会改变溶液的PH值
建议做一个PH梯度摸索一下反应的最适PH
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4楼2011-05-05 11:07:32
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lixiang1642

铜虫 (初入文坛)
★
ht300(金币+1):谢谢参与
ht300(金币+1): 2011-05-19 09:37:49
ht300(金币+1): dna过量200倍是浓度比金胶的吗？ 2011-05-19 09:40:59
引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-03-07 16:24:46:
在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下

我之前做过几次,在0.5xTBE buffer里,5nm的金,dna过量200倍,以0.05M NaCl/3h的速度加NaCl,没有什么问题...可以到0.5M都稳定.

200倍是dna链和纳米金颗粒的摩尔比

[ Last edited by lixiang1642 on 2011-5-19 at 10:31 ]
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5楼2011-05-19 05:23:57
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lixiang1642

铜虫 (初入文坛)
★
ht300(金币+1): 2011-05-19 09:37:53
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-05-19 18:11:03
引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-03-07 16:24:46:
在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下

之前的帖子里有同学说过要用tcep或dtt活化巯基dna。你可以试一下。我没有活化也能work，但不知道你的情况是不是不太一样。
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6楼2011-05-19 05:29:02
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ht300

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by fanger at 2011-05-03 17:30:08:
那是金纳米团聚了！盐度太大！在保证金不足量时，盐度增加的速度太快，可选择多次少量的加盐！因为金纳米对盐很敏感

一般用什么调节ph？我看文献用醋酸盐缓冲液，但没有具体什么醋酸盐，醋酸钠缓冲液应该对金纳米有影响的啊
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7楼2011-05-19 09:39:39
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fanger

银虫 (小有名气)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-05-19 18:11:11
用PBS
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8楼2011-05-19 16:25:30
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erru521

金虫 (小有名气)
★
ht300(金币+1):谢谢参与
在修饰巯基DNA 是你可以试着在胶体金溶液里加入一定量的非离子表面活性剂，这样胶体金就对盐离子有一定的抗性，防止胶体金的团聚，而且在老化的时候，增加盐离子的浓度，从而增加DNA的连接量
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9楼2011-07-18 21:05:27
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小赤兔

木虫 (正式写手)
★
ht300(金币+1):谢谢参与
一方面控制溶液的离子强度，另一方面调节溶液的ph值，一般用PBS缓冲液，还有一些文献用的是甘氨酸-氢氧化钠溶液，不过你可以再查下，用这的不是很多
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10楼2011-07-20 16:06:59
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BAXIABAXIA

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
红舟流星: 欢迎新虫来生物材料板块交流，有问题可以开新帖询问 2013-07-01 21:25:55
引用回帖:
5楼: Originally posted by lixiang1642 at 2011-05-19 05:23:57
我之前做过几次,在0.5xTBE buffer里,5nm的金,dna过量200倍,以0.05M NaCl/3h的速度加NaCl,没有什么问题...可以到0.5M都稳定.

200倍是dna链和纳米金颗粒的摩尔比
...

请问您指的0.5M 是0.5 mol么？ 大写的M不是代表mol/L的意思么？我看了Mirkin的文献说稀释到1M我就很奇怪。加入小浓度的比如0.05 M 的氯化钠，最后怎么浓度能到0.5 M 呢？如果M 只得是mol/L的话？
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11楼2013-07-01 16:12:19
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