应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 【求助】胶体金标记DNA的问题
151/2返回列表12下一页
查看: 4924  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qqzhang12

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】胶体金标记DNA的问题 已有4人参与

请教各位，我想用巯基化的DNA标记胶体金，为什么总是连接不上呢？一加入NaCl，胶体金就开始聚集，请问有谁知道是为什么吗？谢谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
新手上路，请多多关照
1楼 2010-01-12 15:54:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎常来生物材料版！ 1-15 15:21
没人回答这个问题……
我也没做过这个方向，蛮讨论一下。
1、你怎么知道DNA没有标记上去？之前，DNA的巯基是不是已经发生交联？有没有定过SH的量？
2、加入NaCl的目的是什么？在哪一步加入？金表面是什么配体？NaCl要梯度加入。

[ Last edited by qingbo62 on 2010-1-13 at 17:52 ]
赞一下(11人) 回复此楼
2楼2010-01-13 10:41:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqzhang12

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qingbo62 at 2010-1-13 10:41:
没人回答这个问题……
我也没做过这个方向，蛮讨论一下。
1、你怎么知道DNA没有标记上去？之前，DNA的巯基是不是已经发生交联？有没有定过SH的量？
2、加入NaCl的目的是什么？在哪一步加入？金表面是什么配体？ ...

是因为在加入NaCL 进行陈化的时候发现胶体金变色了，也就说明它聚集了，如果DNA 已经接上去的话是不会发生这种情况的。DNA的巯基之前没有计算过，多少会发生交联，但是不会全部都交联。纳米金表面是柠檬酸根离子
赞一下 回复此楼
新手上路，请多多关照
3楼2010-01-15 11:20:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):偶觉得，可能pH和离子浓度影响比较大，还有一个就是杂质问题~谢谢专家的回答~ 1-15 20:55
一、确认你合成的金纳米颗粒的质量（保证用干净的瓶子等等，正确的表征），不过这步出问题的可能性比较低；

二、确认DNA的浓度（UV光谱，确度DNA的质量是否合格，谁提供的，是否可靠）和巯基浓度（DTNB确定）。如果不确定SH浓度，就用TCEP进行预处理1h再反应。如果还不行，把TCEP的浓度提高，再除去TCEP。
这步非常关键，我觉得你可能是这步出的问题。

三、最好反应在玻璃瓶中进行，对玻璃瓶进行NaOH预处理。

四、DNA是否存在碱基对之间的作用从而导致颗粒的团聚？相关于一个linker了。排除以上因素再验证这一条。

还补充一个就是NaCl浓度，要从低浓度开始加，如0.1M或0.05M。

[ Last edited by qingbo62 on 2010-1-15 at 15:28 ]
赞一下(11人) 回复此楼
4楼2010-01-15 15:25:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqzhang12

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qingbo62 at 2010-1-15 15:25:
一、确认你合成的金纳米颗粒的质量（保证用干净的瓶子等等，正确的表征），不过这步出问题的可能性比较低；

二、确认DNA的浓度（UV光谱，确度DNA的质量是否合格，谁提供的，是否可靠）和巯基浓度（DTNB确定）。 ...

你好，谢谢你的建议，我的DNA是上海生工的，我是逐步稀释的所以没有用紫外来确定浓度，下一步会做下紫外的检测，对于先用TCEP预处理的文献，我也有看，我想请教一下怎么除去多余的TCEP呢 我看了用DTT预处理的还用到了column 5，因为我没有做过这类的处理，而且我们实验室的条件比较简陋，很多东西都没有，所以我想请教下。现在我正在做的是参照的是mikin的 JACS,1998,120,1959-1964 这篇文章。还有我用的玻璃瓶都已经硅烷化过了。
赞一下 回复此楼
新手上路，请多多关照
5楼2010-01-16 15:14:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XJP1007

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
，我也在做这方面，遇到了相同问题，希望各位大侠给予帮助啊！！我邮箱是：xuejianpeng@yahoo.cn。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-01-16 16:55:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ywliustc

金虫 (小有名气)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论！！ 1-17 17:09
Nacl可能是因为中和了部分电性导致聚集的，需要控制一个最佳的浓度
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2010-01-17 11:31:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangzhaowu728

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论！！ 1-17 17:09
纳米金表面要进行磷酸盐修饰啊，以增强纳米金的稳定性。
详细的制备过程你看一下这个方法，这里面写的还是比较详细的。另外多看看Mirkin的文章也不错的。
http://www.namipan.com/d/Prepara ... a98ffef0fe1c1230200
赞一下(11人) 回复此楼
8楼2010-01-17 15:53:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):欢迎讨论~ 1-18 11:22
我觉得这个实验你最大的可能失败原因应该还是来自DNA。
先用DTNB对SH进行定量。
再用TCEP处理，过量一两倍就可以，不用除去。如果要过量10倍，要用柱子或超滤除去。
不要用DTT，因为DTT本身有SH。
赞一下(11人) 回复此楼
9楼2010-01-18 09:07:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乖乖宝贝

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也是刚刚接触这方面的知识，看了大家的讨论，真的觉得受益很多。谢谢咯
赞一下(1人) 回复此楼
尽自己最大的努力，优秀毕业！
10楼2010-02-09 21:56:25
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qqzhang12 的主题更新
151/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +12 且听虎啸 2026-07-09 15/750 2026-07-10 08:12 by jaasxulu
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 68gx6bh3ei 2026-07-09 3/150 2026-07-10 06:53 by pbuc7it0i8
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 68gx6bh3ei 2026-07-09 3/150 2026-07-10 06:33 by pbuc7it0i8
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ph7bxbho8f 2026-07-09 3/150 2026-07-10 05:53 by j4frgf6zcw
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 al9t2f50x3 2026-07-09 4/200 2026-07-10 05:33 by j4frgf6zcw
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[基金申请] 信息学部会评时间 +3 xuel2011 2026-07-06 3/150 2026-07-09 19:05 by mollyzhang_2003
[基金申请] 祈祷青基必中 50+3 hadengry 2026-07-09 9/450 2026-07-09 17:37 by 文杰猪猪
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +3 S778950906 2026-07-08 5/250 2026-07-09 15:46 by S778950906
[有机交流] 硝基还原 20+3 暮年飞雪 2026-07-07 5/250 2026-07-09 13:30 by tfang
[基金申请] 化学口会评？应用基础研究和基础研究，希望能分开 +3 Tide man 2026-07-08 3/150 2026-07-09 11:36 by dede5556
[基金申请] 今年E04面上 +15 布布和一二 2026-07-05 21/1050 2026-07-09 10:25 by 学员fOzRO9
[硕博家园] 大龄残疾硕士的一点执念 +14 3776737374 2026-07-06 22/1100 2026-07-09 06:07 by lovechizi
[基金申请] 生命口会评 +4 wuke100666 2026-07-07 4/200 2026-07-08 16:38 by 逍遥不够自在
[教师之家] 网络举报学术不端成为了男女之间情杀的手段了，真荒唐。。。 +3 zju2000 2026-07-04 3/150 2026-07-07 21:00 by hyx552200
[有机交流] Suzuki偶联中硼酸酯原料掉下的硼酸酯是否可以自身偶联，生成B2Pin2杂质 500+3 天下大同 2026-07-06 3/150 2026-07-07 10:31 by martyr_oyx
[论文投稿] 刑法学论文投稿求助 +3 高源678 2026-07-04 5/250 2026-07-06 12:20 by 平天尺
[论文投稿] Journal of Environmental Chemical Engineering +3 雪花天涯 2026-07-05 3/150 2026-07-06 09:00 by bobvan
[基金申请] 最后一年，祈求好运 +3 pyw1992 2026-07-06 3/150 2026-07-06 08:53 by 苏_frp
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭