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【求助】胶体金标记DNA的问题 已有4人参与
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| 请教各位，我想用巯基化的DNA标记胶体金，为什么总是连接不上呢？一加入NaCl，胶体金就开始聚集，请问有谁知道是为什么吗？谢谢了！ |
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7楼2010-01-17 11:31:58
qingbo62
木虫 (正式写手)
- BM-EPI: 1
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 2207.7
- 散金: 43
- 红花: 5
- 帖子: 371
- 在线: 61.3小时
- 虫号: 828137
- 注册: 2009-08-14
- 专业: 高分子合成化学
2楼2010-01-13 10:41:51
3楼2010-01-15 11:20:44
qingbo62
木虫 (正式写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):偶觉得，可能pH和离子浓度影响比较大，还有一个就是杂质问题~谢谢专家的回答~ 1-15 20:55
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):偶觉得，可能pH和离子浓度影响比较大，还有一个就是杂质问题~谢谢专家的回答~ 1-15 20:55
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一、确认你合成的金纳米颗粒的质量（保证用干净的瓶子等等，正确的表征），不过这步出问题的可能性比较低； 二、确认DNA的浓度（UV光谱，确度DNA的质量是否合格，谁提供的，是否可靠）和巯基浓度（DTNB确定）。如果不确定SH浓度，就用TCEP进行预处理1h再反应。如果还不行，把TCEP的浓度提高，再除去TCEP。 这步非常关键，我觉得你可能是这步出的问题。 三、最好反应在玻璃瓶中进行，对玻璃瓶进行NaOH预处理。 四、DNA是否存在碱基对之间的作用从而导致颗粒的团聚？相关于一个linker了。排除以上因素再验证这一条。 还补充一个就是NaCl浓度，要从低浓度开始加，如0.1M或0.05M。 [ Last edited by qingbo62 on 2010-1-15 at 15:28 ] |
4楼2010-01-15 15:25:49
