24小时热门版块排行榜    

查看: 1090  |  回复: 6

1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] 关于DNA连接的问题

现在有两段约23bp的双链DNA片段,要把他们连接成一段约60bp的双链DNA,应该用什么方法,各种试剂使用多少的量?连接完以后用什么方法纯化一下,然后要和质粒载体连接? 非常感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1066479423: 金币+3 2013-01-27 13:04:42
用PCR连起来 你现在序列没有重叠部分的话 重新订引物吧。
2楼2013-01-25 22:15:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

也可以设计两段包含目标序列的长引物,在末端放BsaI酶切位点,直接PCR载体后, 酶切连接
3楼2013-01-25 22:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WilliamHJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两段合起来才60bp,那不如直接去合成好了,当成引物合成的话,一个bp才一块多。。
学习中
4楼2013-01-26 14:04:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1066479423

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by WilliamHJ at 2013-01-26 14:04:28
两段合起来才60bp,那不如直接去合成好了,当成引物合成的话,一个bp才一块多。。

谢谢,不过已经合成好了,只能这样做了
5楼2013-01-26 16:47:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1066479423

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-01-25 22:15:36
用PCR连起来 你现在序列没有重叠部分的话 重新订引物吧。

PCR连接和序列没有重叠部分  什么意思?不太懂您说的,刚开始做实验,很多都不懂,还望指教。非常感谢
6楼2013-01-26 16:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1066479423

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-01-25 22:19:07
也可以设计两段包含目标序列的长引物,在末端放BsaI酶切位点,直接PCR载体后, 酶切连接

嗯,谢谢,已经合成好了
7楼2013-01-26 16:51:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1066479423 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见