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hwchen2000金虫 (正式写手)
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[求助]
RT-PCR高手请进
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请高手们帮我看看RT-PCR的电泳图，给点建议 图2中箭头所指是曾经得到的产物，但是之后再也没有重复到，图1是PCR和第二轮PCR结果  图片1.jpg  图片2.jpg [ Last edited by hwchen2000 on 2013-1-2 at 11:05 ] |
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zhaodahe
木虫 (正式写手)
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2楼2013-01-02 17:27:39
zhang881007
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- 专业: 生物化学
3楼2013-01-04 16:59:11
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| 楼主的RT-PCR没有做出来，首先要确定产物的大小，和标准条带对比看看是否扩增出来了，从两个图看，根本没有扩增出来。如果已经重复很多次了都是这样的话，建议重新开始：方法一、提取mRNA时先跑个琼脂糖快速电泳看看是否出现2或3个条带，出现的话说明mRNA这一步没有问题；方法二、换成随机引物做PCR扩增，如果出现明显条带就说明楼主的引物设计有问题，如果不出现条带说明可能是mRNA降解了压根就没有成功合成过cDNA。 |
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hwchen20004楼2013-01-04 17:53:46
hwchen2000
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5楼2013-01-07 20:52:12
