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关于PCR,跑胶,求分析胶片
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fanwq258
木虫
(正式写手)
应助: 18
(小学生)
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帖子: 686
在线: 659小时
虫号: 1694785
[交流]
关于PCR,跑胶,求分析胶片
这是这几天跑得胶,为什么一直有拖尾似的东西。而且以前可以跑出来的引物也有那样的拖尾似的东西,并且挺多的。求解惑啊!求指点啊!
Administrator 2012-12-27 22hr 49min.jpg
Administrator 2012-12-29 16hr 14min.jpg
Administrator 2012-12-29 21hr 16min.jpg
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1楼
2012-12-30 21:51:34
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rainbow3311
铁虫
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
fanwq258: 金币+1
2013-01-02 14:22:42
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流
2013-01-02 17:12:23
是很奇怪,连标准条带的点样孔都发亮,说明楼主的点样孔有大片段的DNA组污染。楼主可以只做一个标准条带先看看点样孔是否发亮,如果不发亮,说明你的样品被大片段的DNA污染了;如果发亮,那就是楼主的操作上有问题,例如枪头、EB溶液被污染等。从图片上看,PCR产物不稳定,有很多非特异性扩增(引物设计不好导致)。楼主应该根据标准条带和目的产物的大小,先看看是否有目的产物扩增出来了。
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35楼
2013-01-02 13:42:39
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sj_wu
金虫
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fanwq258: 金币+1
2013-01-01 13:05:24
还算正常,只是没有主带,拖尾是其他能被EB染色的杂质,如蛋白、酶以及其他分子
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2楼
2012-12-30 21:57:56
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fanwq258
木虫
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虫号: 1694785
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
sj_wu
at 2012-12-30 21:57:56
还算正常,只是没有主带,拖尾是其他能被EB染色的杂质,如蛋白、酶以及其他分子
,但是为什么每次都有拖尾呢?
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3楼
2012-12-30 22:17:50
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cicelyzh
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fanwq258: 金币+1
2013-01-01 13:05:44
跑的是什么?PCR产物吗?感觉是样品不干净。marker不拖说明是样品问题。还有,你的胶的点样孔怎么那么亮啊。
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4楼
2012-12-31 06:18:46
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