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fanwq258

木虫 (正式写手)

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[交流] 关于PCR，跑胶，求分析胶片

这是这几天跑得胶，为什么一直有拖尾似的东西。而且以前可以跑出来的引物也有那样的拖尾似的东西，并且挺多的。求解惑啊！求指点啊！

Administrator 2012-12-27 22hr 49min.jpg

Administrator 2012-12-29 16hr 14min.jpg

Administrator 2012-12-29 21hr 16min.jpg

Administrator 2012-12-30 15hr 19min.jpg

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1楼 2012-12-30 21:51:34

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rainbow3311

铁虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★
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fanwq258: 金币+1 2013-01-02 14:22:42
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2013-01-02 17:12:23

是很奇怪，连标准条带的点样孔都发亮，说明楼主的点样孔有大片段的DNA组污染。楼主可以只做一个标准条带先看看点样孔是否发亮，如果不发亮，说明你的样品被大片段的DNA污染了；如果发亮，那就是楼主的操作上有问题，例如枪头、EB溶液被污染等。从图片上看，PCR产物不稳定，有很多非特异性扩增（引物设计不好导致）。楼主应该根据标准条带和目的产物的大小，先看看是否有目的产物扩增出来了。

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