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wawa13998

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于LA-PCR的问题 已有4人参与

本人新手,做LA-PCR,LA-TAQ用完了,用EX-TAQ可以么,目的条带大概是15-16KB,还有用LA-PCR时用的是普通的PCR仪么?反应条件是预变性96度 2min, (98度 10s, 58度 10min), 30个循环,72度10min   
还有DNA模板加入反应体系之前要先变性吗

[ Last edited by wawa13998 on 2012-12-20 at 11:42 ]
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beer胖

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
超过10k的,用E-Taq不好扩增,最好还是用LA-Taq
4楼2013-05-28 09:48:50
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一直寂寞的鱼

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议PCR相关书籍或者下载相关文献看看吧,再或者问你的师兄或者师姐!你的问题很笼统,无法回复!
幸福永远
2楼2013-05-26 15:54:18
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以试试,不一定能扩出来,我的片段用LA可以,EX就不行。用不着什么特殊的PCR仪,普通的就可以,长片段2步法比较好。PS:酶没有了不要买吗?
3楼2013-05-26 20:37:10
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protura

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
15-16kb,用EX怕是不行的。
LA-taq扩增似乎只能是普通PCR仪吧。
PCR体系中的DNA模板不需要提前变性。
5楼2013-05-28 10:10:00
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