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wawa13998

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于LA-PCR的问题 已有4人参与

本人新手，做LA-PCR，LA-TAQ用完了，用EX-TAQ可以么，目的条带大概是15-16KB，还有用LA-PCR时用的是普通的PCR仪么？反应条件是预变性96度 2min, （98度 10s， 58度 10min）， 30个循环，72度10min   
还有DNA模板加入反应体系之前要先变性吗

[ Last edited by wawa13998 on 2012-12-20 at 11:42 ]
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1楼 2012-12-20 11:16:56
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一直寂寞的鱼

木虫 (正式写手)
★
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建议PCR相关书籍或者下载相关文献看看吧，再或者问你的师兄或者师姐!你的问题很笼统，无法回复！
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幸福永远
2楼2013-05-26 15:54:18
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以试试，不一定能扩出来，我的片段用LA可以，EX就不行。用不着什么特殊的PCR仪，普通的就可以，长片段2步法比较好。PS：酶没有了不要买吗？
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3楼2013-05-26 20:37:10
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beer胖

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
超过10k的，用E-Taq不好扩增，最好还是用LA-Taq
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4楼2013-05-28 09:48:50
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protura

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
15-16kb，用EX怕是不行的。
LA-taq扩增似乎只能是普通PCR仪吧。
PCR体系中的DNA模板不需要提前变性。
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5楼2013-05-28 10:10:00
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