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1楼2012-12-16 18:06:53

cicelyzh

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【答案】应助回帖

引用回帖:

4楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-12-17 09:50:00
循环30个算多吗？...

不算多，如果扩增效率不错的话可以用25个。

5楼2012-12-17 13:06:30

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shujunru

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你重新做一遍PCR，使用高保真酶，注意说明书，象pfu是不能在扩增结束时加A的，不能做T载体连接；

2楼2012-12-17 06:22:03

cicelyzh

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如果序列不长的话用taq没问题，再挑几个克隆去测序。不行的话重做PCR，循环数不要多。大片段用高保真酶做，P好后加A，再做TA克隆。

3楼2012-12-17 09:31:20

yuguiyan

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3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-17 09:31:20
如果序列不长的话用taq没问题，再挑几个克隆去测序。不行的话重做PCR，循环数不要多。大片段用高保真酶做，P好后加A，再做TA克隆。

循环30个算多吗？

4楼2012-12-17 09:50:00