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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达不出来是怎么回事？
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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达不出来是怎么回事？

我最近在做蛋白表达，重组质粒测序正确，但是表达出来和空载体一模一样，没有目的带，请问是怎么回事？

我用的是pet32a载体，酶切位点是BamH1和Xhol1,诱导温度是37度，IPTG浓度1mmol/L, 菌株为rosseta,全菌电泳
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1楼 2012-11-30 15:19:17
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first-006

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2012-12-08 02:00:27
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小河虾

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
基因序列有没有稀少密码子?
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God helps the man who helps himself
2楼2012-11-30 15:32:25
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lihaizhen

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个真不好说，说明没有表达，载体的启动子区域除了问题，不然，如果目的基因连上，肯定有诱导表达的条带的
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3楼2012-11-30 15:38:04
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xiefl1984

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能有很多种情况，是不是发酵过程中质粒丢失了。
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-30 16:37:08
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