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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达不出来是怎么回事?

我最近在做蛋白表达,重组质粒测序正确,但是表达出来和空载体一模一样,没有目的带,请问是怎么回事?

我用的是pet32a载体,酶切位点是BamH1和Xhol1,诱导温度是37度,IPTG浓度1mmol/L, 菌株为rosseta,全菌电泳
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飒飒东风

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大三学生  飘过  。
1受体细胞选择要多样性
2.你确定导入到受体细胞了并随之稳定遗传复制。
3.是不是被受体细胞排斥啊  多试几个受体。
和气生财研究也是
6楼2012-12-02 00:03:40
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小河虾

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
基因序列有没有稀少密码子?
God helps the man who helps himself
2楼2012-11-30 15:32:25
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lihaizhen

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个真不好说,说明没有表达,载体的启动子区域除了问题,不然,如果目的基因连上,肯定有诱导表达的条带的
3楼2012-11-30 15:38:04
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xiefl1984

木虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能有很多种情况,是不是发酵过程中质粒丢失了。
4楼2012-11-30 16:37:08
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