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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何进行表达载体构建
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sj082csh

银虫 (小有名气)

[求助] 如何进行表达载体构建

最近需要构建表达载体，很多都不知道，求高手提供资料，或者指点一二，感激不尽。
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1楼 2012-11-29 20:07:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

czdaeq

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2012-12-14 21:13:42
sj082csh: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:36:15
这个很难说明白，不过一般步骤，你可以依据看的文献，总结一下他们1、用啥载体，多少拷贝，是由什么改造而来；2、什么启动子；3、表达什么类型的基因（途径酶？膜蛋白？特殊功能蛋白）；4、采用诱导型还是组成型？5、载体构建采用什么方法：传统酶切连接？融合PCR？CPEC？
然后在从中挑选1、频率最高；2、发表期刊水平最高。
这样就挑好模板了，剩下就该实际摸索了。
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23楼2012-12-14 18:01:15
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普通回帖

sj082csh

银虫 (小有名气)
构建的表达载体是要稳定转染到动物细胞中的
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2楼2012-11-29 20:11:35
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sj082csh: 金币+1, ★有帮助, .。 2012-12-02 23:45:39
我也正想问这个问题呢！！！！！！！！！！！！！
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3楼2012-11-29 22:26:14
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sj082csh: 金币+2, ★有帮助, .. 2012-12-02 23:46:02
选择合适的表达载体是建立在你们实验室已有载体和常用载体的基础上的，一般来说，pet系列用的最多，也好用，你可以试试。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2012-11-30 09:53:09
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
sj082csh: 金币+1, ★有帮助, .. 2012-12-02 23:47:32
引用回帖:
2楼: Originally posted by sj082csh at 2012-11-29 20:11:35
构建的表达载体是要稳定转染到动物细胞中的

那就不是表达载体啦，稳定转染的是需要逆转录病毒载体的。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2012-11-30 09:56:17
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-11-30 09:56:17
那就不是表达载体啦，稳定转染的是需要逆转录病毒载体的。。
...

那可不一定，用一些专用的转染试剂也是可以的
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万物皆有毒，只要剂量足
6楼2012-11-30 15:56:26
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xiefl1984

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sj082csh: 金币+1, ★有帮助, .. 2012-12-02 23:50:04
多查找点资料，有很多相关内容的。
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7楼2012-11-30 16:33:56
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 448935271 at 2012-11-30 15:56:26
那可不一定，用一些专用的转染试剂也是可以的...

额，我也学习下下。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2012-11-30 23:40:51
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bloodwar

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sj082csh: 金币+1, ★有帮助, .. 2012-12-02 23:51:05
没做过动物的，只做过植物，帮不了了
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9楼2012-12-01 02:20:54
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sj082csh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-11-30 09:53:09
选择合适的表达载体是建立在你们实验室已有载体和常用载体的基础上的，一般来说，pet系列用的最多，也好用，你可以试试。。

对这方面一窍不通，需要看些什么资料呢？望不吝赐教
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10楼2012-12-02 23:47:13
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