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yanglx1991

新虫 (初入文坛)

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★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:36:31
一般进行酶切、然后酶连,但一定得注意其bilious
21楼2012-12-14 11:52:12
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dkyy970111

铁杆木虫 (小有名气)

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有现成的载体卖,买一个克隆进去就可以了
打铁还要自身硬
22楼2012-12-14 13:08:13
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czdaeq

铜虫 (著名写手)

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★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2012-12-14 21:13:42
sj082csh: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:36:15
这个很难说明白,不过一般步骤,你可以依据看的文献,总结一下他们1、用啥载体,多少拷贝,是由什么改造而来;2、什么启动子;3、表达什么类型的基因(途径酶?膜蛋白?特殊功能蛋白);4、采用诱导型还是组成型?5、载体构建采用什么方法:传统酶切连接?融合PCR?CPEC?
然后在从中挑选1、频率最高;2、发表期刊水平最高。
这样就挑好模板了,剩下就该实际摸索了。
23楼2012-12-14 18:01:15
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

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★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:36:08
可以根据你做的内容查询相关的文献,会介绍的很详细的,我们实验室都是这么做的啊
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
24楼2012-12-14 18:25:37
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

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★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:36:00
我周围的同学有做的,目的片段是RT-PCR获得,信号肽是某一病毒信号肽,表达载体是老师馈赠。
25楼2012-12-15 10:30:45
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shujunru

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:35:51
你要转到什么细胞?准备用什么表达载体?用什么筛选系统?如果这些你都不知道的话,取看看基因工程吧
26楼2012-12-18 05:59:17
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