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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何进行表达载体构建
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sj082csh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-11-30 09:56:17
那就不是表达载体啦，稳定转染的是需要逆转录病毒载体的。。
...

我好多都不懂，刚接触，可能描述有问题。想表达的意思是怎样能够构建一个较好的表达载体，并且能转染到动物细胞中，能进行相关检测与实验。望不吝赐教
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11楼2012-12-02 23:49:51
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sj082csh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiefl1984 at 2012-11-30 16:33:56
多查找点资料，有很多相关内容的。

重点是要看哪些方面的资料，请多多指教
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12楼2012-12-02 23:50:40
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by sj082csh at 2012-12-02 23:47:13
对这方面一窍不通，需要看些什么资料呢？望不吝赐教...

你还别说，我都是在实验室已有基础上的，资料看的倒是不是很多，你找找分子克隆实验指南看看，我觉得应该有的
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13楼2012-12-03 08:54:21
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
11楼: Originally posted by sj082csh at 2012-12-02 23:49:51
我好多都不懂，刚接触，可能描述有问题。想表达的意思是怎样能够构建一个较好的表达载体，并且能转染到动物细胞中，能进行相关检测与实验。望不吝赐教...

楼主是哪个学校的啊？
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14楼2012-12-03 22:17:07
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ArinHu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:37:00
看一下分子克隆实验指南
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15楼2012-12-04 08:44:08
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ArinHu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:37:49
引用回帖:
15楼: Originally posted by ArinHu at 2012-12-04 08:44:08
看一下分子克隆实验指南

http://ishare.iask.sina.com.cn/d ... php?fileid=22731278    可以下载
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16楼2012-12-04 08:49:05
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chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
sj082csh: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:37:10
要稳定转染到动物细胞是比较困难的，有转染试剂可以实现，但是后期筛选的时间是很长的，大概起码要半年，还不一定有结果，我们都用瞬时转染做动物细胞的
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17楼2012-12-04 08:52:23
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lxyyzz

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:37:18
如果细胞比较好转，用转染试剂瞬转然后筛选就可以了，pcDNA3.1是用的比较多的。
如果细胞比较难转，可以考虑用病毒转染，病毒转染载体分很多种，具体可以根据不同的需求在addgene上面查你想要的。
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18楼2012-12-04 10:53:23
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:37:36
分子克隆实验指南什么的都可以看
也可以看看载体的说明书
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加油
19楼2012-12-04 16:37:59
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huoyongting

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
sj082csh: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-05 14:37:30
自己从头构建的话成本也不低的，而且要花很长时间，不如直接买商业化的载体
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20楼2012-12-04 17:10:43
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