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张小逸

铜虫 (小有名气)

[求助] RNA提取检测有杂带,不知能不能往下做

本人提取鱼的组织RNA,用的是takara的试剂盒,提出来后总是有杂质,有DNA条带。后续实验要做realtime,race,不知道这样的rna能不能往下做?有没有好的方法在提取的时候去除RNA?

2nE2垂体雄、雌-2nE2卵巢-12.11.24.JPG



2nE2肌肉雄-2nE2肌肉雌-2nE2肾雄-2E2肾雌-2n肝-2nE2精巢-12.11.22.JPG



2n肝-2nE2雄肝-2nE2雌肝-RNA-12.11.22.JPG
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bloodwar

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
再额外加1uL的DNAse,37度15min,应该能除去所有的DNA
3楼2012-11-29 05:01:35
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

我现在在做植物的racr,有点崩溃的感觉

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2012-11-29 02:09:56
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
吸取上清时不要贪多,尽量不要吸到中间层(中间层的DNA和其他杂质很多)。
溶解RNA后用DNA酶处理掉DNA后,可以进行反转录和QPCR。
4楼2012-11-29 08:56:32
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主上样量太大了吧?我感觉是,你减少一下上样量吧,这个RNA提取的应该还可以的,再跑次胶试试
5楼2012-11-30 17:08:33
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