应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 目的基因的连接与转化
51/1返回列表
查看: 1757  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

today521328

新虫 (初入文坛)

[求助] 目的基因的连接与转化

求助：目的基因与质粒连接后4℃冰箱可以放多久，我已经放了一天多了，感受态细胞还没到，想问下连接体系是不是会有问题。还有 转化后的感受态放4℃能放多久啊！转化后在4℃放两三天应该可以用吧！谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-11-22 14:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

q7111988

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
today521328: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢！帮大忙了，我的目的基因与载体已经连接了三天了，定的感受态细胞还没到，怕连接体系有问题，看到你的回答，方向你多了。我16℃连接1-2小时，然后放在4℃已经3天了，应该没事吧！谢谢！ 2012-11-23 09:49:47
我们做连接时放到16度，一直放上个3、4天都没问题。转化后的感受态就该直接加LB-液体培养基培养了，培养后的菌液就不算是感受态了，而是可能含有转化质粒的菌了，然后涂板倒置过夜培养就行了，若是大肠杆菌是37度培养，若是农杆菌则是28度，不需要放4度啊。
赞一下(1人) 回复此楼
Life is a pure flame, and we live by an invisible sun within us.
4楼2012-11-22 16:12:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看不大懂你的操作步骤，连接过后放4度一段时间不要紧，一段时间指一两天，如果短时间内不转化放-20度冻着吧

转化过后还放4度？转化之后，也就是热激后复苏一下直接涂板了，不能放4度，菌被冻死了，本来感受态细胞就能脆弱。

或者我没有理解你的问题，不知道你是不是指转化的时候孵育温度和时间？
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-11-22 14:44:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drxiao2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
today521328: 金币+3, ★★★很有帮助, 回答的很好，谢谢！以后经常交流 2012-11-23 09:46:18
连接4℃1天后可放-20℃，应该没问题。
热激后，感受态细胞最好37或28℃摇一阵恢复一下活力。再放4℃ 2~3天，也问题不大。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-11-22 15:44:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 10:26 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 5/250 2026-09-29 09:52 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 09:24 by JzYBbHIXWSrW
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 09:18 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:34 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:18 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:28 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +7 zju2000 2026-09-26 8/400 2026-09-28 16:42 by beefly
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭