24小时热门版块排行榜    

查看: 1779  |  回复: 5

bio0407110

铜虫 (初入文坛)

[求助] 提取RNA条带28/18为什么总是不成两倍关系啊?

尊敬的各位大侠们,这是我提的植物叶片RNA跑的1%非变性琼脂糖电泳,因为后续实验对RNA要求很高很高,所以提了很多很多次了,但是总是没有传说中的28S/18S亮度为2/1啊!而且很多情况下尽然反过来,看似28S/18S为1/2是怎么回事儿呢?降解了吗?请多多指教啊!愁死。。。

111 2012-11-06 23hr 13min.5sc.jpg



111 2012-10-30 23hr 03min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

男儿何不带吴钩,收取关山五十州
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-11-14 16:27:36
后续要求高,是要做RNA-seq么
其实很多物种的RNA胶图都不是2:1的关系的……不少植物的也是这样的。你想确定它的质量,权威的方法是找一个安捷伦2100,跑一下样品,它会给出详细的报告(针对植物有个专门的设定,这也再次证明植物的RNA和动物不大一样)
如果搞不到,只能看胶图的话,那么你可以看弥散严不严重,看条带亮度,是不是边缘清晰(sharp否?),这些都比2:1啥的要重要
2楼2012-11-07 14:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wppabcd

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-14 16:27:47
提的快的话应该有2:1的情况,前段时间做过测序,是要求2;1的,第一个片子上,上面明显是有污染的。下面那个片子得多跑一段时间,看来楼主技术不错,RNA很完整,让第二条带和其它带分离完全了,建议用2%的胶跑,新换电泳液
3楼2012-11-07 17:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi20092

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑胶上样有点大 上1/2试试看 图片再暗点就可以看出来是不是2:1了,太亮了看不出来。总体提的不错。
4楼2012-11-07 21:44:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hchen82

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-11-14 16:27:56
本帖内容被屏蔽

5楼2012-11-14 10:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yx_sun70

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没必要追求2:1,若只是做rt,胶中的rna完全可用。若做race,你的较用起来应该也没有问题。你条带下册看不出讲解的痕迹,同时条带也很清晰,若不是要求很高的后续实验,应用完全没问题
6楼2012-11-24 23:40:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bio0407110 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见