应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE跑得很难看，请高手分析
51/1返回列表
查看: 1817  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

weizhe34

至尊木虫 (职业作家)

[求助] SDS-PAGE跑得很难看，请高手分析

SDS-PAGE跑得很难看，请高手分析：
10%的分离胶，4%的浓缩胶，电压：分离胶120V浓缩胶80V，缓冲液刚配的，在浓缩时没有浓缩成一条线，很粗。请高手分析！
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 未命名.jpg
    • 2012-10-27 19:27:41, 46.43 K

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-10-27 19:27:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by weizhe34 at 2012-10-30 13:21:33
你可能配胶的AB出现问题了？？是AP?还是？？？
蛋白不大的只有30KD
...

我说的蛋白量大，不是说你的蛋白分子量大。。。
AP要是出问题了一般都不凝了。。。
你先重配个100ml的AB试试，
另外，你能把你其他的试剂啥的都保证完全正确么？
还有TRIS的pH，你都测好了么
如果你的胶孔一共10个，你只有4个样的话，加上一个marker,就是5个孔，剩下的最好用LOADING BUFFER+电泳缓冲液补充到上样体积，10个孔一起跑，就不会出现泳道不直了。。。
多试试就好了。。。呵呵
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-30 18:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

meihuayi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确实够难看的，不过我也跑过更难看的。没听说其他办法，你把制胶的buffer全部用新的配制，跑胶buffer换新的吧
赞一下 回复此楼
只是在在交流中才能碰撞出火花
2楼2012-10-27 22:09:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流问题 2012-10-28 17:49:09
感觉是胶做的不行，可能样品也没处理好。首先检查制胶缓冲液的pH是否正确，把做胶的所有溶液配好后过滤。你的上样量是多少，体积？上样前是否离心？分离胶凝的速度。如果浓缩不好，可能是浓缩胶Tris pH不对，或者是上样buffer的pH不对，还可能是上样体积过大而浓缩胶过短。
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-28 03:29:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极应助 2012-10-28 17:49:43
个人几点建议，仅供参考！
1.分离胶凝固之后，在灌注浓缩胶之前一定要把液封的水尽量的用折过的滤纸吸净；
2.拔梳子的时候两边用力均匀些，不要把胶孔弄的大小不一；
3.电泳的时候前沿指示剂（溴酚蓝）的条带过了浓缩胶后，可适当降低电压到80-90V；
4.第五、第六泳道的样品处理的不好，每次用之前都要沸水浴10min，而且可以适当减少上样量。
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-28 15:34:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金中了 +12 laoda193707 2026-08-06 12/600 2026-08-07 19:16 by zhendaodan
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +6 且听虎啸 2026-08-07 9/450 2026-08-07 18:40 by naalan7001
[基金申请] 关于filecode +3 布布和一二 2026-08-07 6/300 2026-08-07 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭