24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 990  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tmoonday

金虫 (小有名气)

[求助] 急急急!诡异基因PCR扩不出来。。。

小弟最近在扩一基因,第一次试条件的时候扩出来了,但是其后在相同条件下,连续扩了3-4次都没扩出来,不过照胶时貌似有200-300bp片段出现(本人基因在1200-1300bp),请问各位大牛,我应该怎么做哈?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

等一份缘分
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niena

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by tulip1213 at 2012-10-21 10:24:56
模板要稀释的,重新逆转录吧,高保真酶的产物容易降解。放一天产物就降解...

我遇到了同样的情况,目标条带1kb,但扩增出来的200-400bp,我做了梯度,结果也是这样,用的是phusion酶
7楼2012-10-22 14:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

水寒冰006

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
tmoonday: 金币+1, 有帮助 2012-10-22 10:56:23
既然第一次能P出来,说明你的引物应该没有问题,先确保你的酶没有失效,体系没有问题,先试试吧,做个阳性对照。还有你可以拿你之前扩增出来的片段继续P
2楼2012-10-20 17:47:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
考虑换模板,重做。如果第一次使用高保真扩的,用此产物做模板吧
3楼2012-10-20 19:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tmoonday

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tulip1213 at 2012-10-20 19:28:02
考虑换模板,重做。如果第一次使用高保真扩的,用此产物做模板吧

我用第一次扩出来的为模板也没扩出来
等一份缘分
4楼2012-10-21 09:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工371求调剂 +16 陪琳看海 2026-04-04 17/850 2026-04-09 23:27 by 来看流星雨10
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +4 天下ww 2026-04-09 4/200 2026-04-09 21:28 by bljnqdcc
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 计算机11408,286分求调剂 +9 木子念晞 2026-04-05 9/450 2026-04-09 20:04 by vgtyfty
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +3 m永o不v言o弃m 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:17 by 紫曦紫棋
[材料工程] 材料调剂推荐 +3 蛋糕x2 2026-04-07 3/150 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 0703总分331求调剂 +18 ZY-05 2026-04-04 22/1100 2026-04-09 09:09 by 哦哦123
[考研] 化学308分求调剂 +21 你好明天你好 2026-04-07 23/1150 2026-04-08 22:32 by 凯凯要变帅
[考研] 求调剂 +14 张zic 2026-04-05 15/750 2026-04-08 16:14 by 一只好果子?
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 071000生物学,一志愿深圳大学296分,求调剂 +12 TIckLw 2026-04-06 13/650 2026-04-07 20:34 by lijunpoly
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 一志愿C9的化学工程(085602) 340分,感觉校内调剂无望,求调剂 +12 万事宜臻 2026-04-04 12/600 2026-04-06 07:46 by 无际的草原
[考研] 0703求调剂383分 +9 W55j 2026-04-03 9/450 2026-04-06 06:50 by houyaoxu
[考研] 一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-04-04 12/600 2026-04-05 19:04 by 蓝云思雨
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:24 by 544594351
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
信息提示
请填处理意见