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zrtpaopao

金虫 (小有名气)

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[求助] 求助 western blot 分离胶处残留条带

western blot实验胶跑完后在浓缩胶处能看到一排明显的白色条带，继续转膜用丽春红染色也能染出条带但是没有以前的颜色深。我怀疑是不是胶上的蛋白没有完全跑下去剩了一部分在分离胶上？

求正解！！！

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1楼 2012-09-26 17:50:46

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zrtpaopao

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引用回帖:

5楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-09-26 21:14:28
丁香园一位同学的解释，供参考：
“样品没有进入分离胶的原因
样品处理不好，蛋白部分发生凝集，分子量变大造成；蛋白浓度过大，堵住胶孔了；蛋白本身分子量就不适合采用这种方法。
制胶不好，尿素浓度，制胶温度 ...

综合这些原因我觉得很可能是我制胶的问题，因为我每次都是一下处理好多组样品混到一起用的时候随机组合出一组样品上样。再有可能就是上样之前我吧样品离心了一下是不是离心的不对？一般都离心多长时间多大转速？