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zjt829木虫 (正式写手)
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[求助]
蛋白电泳结果帮忙分析
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SDS-page电泳跑出的结果如下，请大家帮忙分析一下原因吧，谢了~ 蛋白：植物组织蛋白提取液（用tris-HCl的方法提的，然后直接与上样缓冲液混合之后上样） 最左边marker：170KD-10KD 请分析  12%分离胶+6%浓缩胶  |
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【答案】应助回帖
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zjt829: 金币+5, ★有帮助, 多谢建议。提取的是总蛋白，跟对照看有毒物质对蛋白的影响 2012-08-24 11:16:10
小丹木木: 金币+2, 热心的虫虫 2012-08-24 13:52:09
zjt829: 金币+5, ★有帮助, 多谢建议。提取的是总蛋白，跟对照看有毒物质对蛋白的影响 2012-08-24 11:16:10
小丹木木: 金币+2, 热心的虫虫 2012-08-24 13:52:09
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从胶上看，蛋白量是没问题的。 样品处理中甘油影响不大，再说没甘油，样品在胶孔沉不下去。植物组织蛋白我没提取过，是不是先的把组织捣碎，用Tris-HCl去浸泡，之后离心取上清浓缩。 我觉得，你在离心之前要取点样，1:1加上样buffer，96度加热个10-15分钟，之后再离心，点样时候只点上清部分的样。同时将你10000rpm4度离心30min，浓缩后的样品也加热点样，两个样做一下对比。 还有，不知道你跑胶是要看什么，总蛋白还是某种蛋白。还是你的蛋白分子量是超过170kd的。 |
6楼2012-08-24 11:13:23
dshlove
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