24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 810  |  回复: 9

西区五号楼

新虫 (小有名气)

[求助] 长PCR产物没有结果

做了,一个长片段PCR,大概跑了8个多小时。结果不仅没有带,而且有很大拖尾,用的模板和以前的相同,引物有变,以前跑出来过。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coal@live.cn

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
拖尾弥散的是非特异扩增,样孔亮的是模板有杂志,100bp下有带的是引物二聚体。
2楼2012-08-14 11:14:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu_shiyong

银虫 (正式写手)

目的产物是多长?有10KB吗?
低调稳重务实内敛---------------残
3楼2012-08-14 11:24:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

healy13

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-15 13:39:29
本帖内容被屏蔽

4楼2012-08-14 13:07:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西区五号楼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-08-14 11:24:04
目的产物是多长?有10KB吗?

可能是8kb到10kb吧!
5楼2012-08-14 14:15:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西区五号楼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by healy13 at 2012-08-14 13:07:13
几个因素:模板浓度有问题;引物浓度有问题;PCR体系加错;保真酶失活;退火温度和延伸时间不准确等等。。。。。这些一个个取摸索,建议先从退火问问试试看!

1,引物浓度和延伸时间可以排除吧,延伸时间是15分钟啊!
2,和实验室的同门用的酶相同,应该也没问题。
3,体系是25微升的。
4,问题主要集中在模版浓度和退火温度上了,前面的图是设了梯度的,结果每个梯度的都没有结果。
6楼2012-08-14 14:24:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

healy13

禁虫 (小有名气)

★ ★
西区五号楼: 金币+2 2012-08-17 09:29:09
本帖内容被屏蔽

7楼2012-08-14 14:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该先试一试退火温度,慢慢摸索,多设几个梯度试试看
8楼2012-08-16 15:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西区五号楼: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-08-17 09:29:19
还有就是,你反应时间过长,东西都被降解了!
9楼2012-08-16 15:55:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西区五号楼

新虫 (小有名气)

内容已删除
10楼2012-08-20 10:01:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 西区五号楼 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 调剂 +4 asdasdassda 2026-04-03 5/250 2026-04-03 14:02 by 百灵童888
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 材料调剂 +5 一样YWY 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:29 by baoball
[考研] 303求调剂 +3 一色清羽 2026-04-02 4/200 2026-04-03 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 085600调剂 +3 1amJJ 2026-04-02 3/150 2026-04-02 22:00 by 科研小专家
[考研] 294求调剂 +3 Grey_Ey 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:34 by swb0218
[考研] 一志愿武汉理工0856,初试334 +3 26考研材料 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:22 by dongzh2009
[考研] 362求调剂 +14 西南交材料专硕3 2026-03-31 14/700 2026-04-02 17:50 by yunlongyang
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 270求调剂 +8 小杰pp 2026-03-31 10/500 2026-04-02 12:57 by yulian1987
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 9/450 2026-04-02 12:09 by ms629
[考研] 土木304求调剂 +3 兔突突突, 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:42 by JourneyLucky
[考研] 070300化学专业279调剂 +10 哈哈哈^_^ 2026-03-31 10/500 2026-03-31 23:13 by liu823948201
[考研] 080200学硕,机械工程专业277分,求带走! +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考研] 276求调剂 +3 赵久华 2026-03-29 3/150 2026-03-31 10:06 by cal0306
[有机交流] 甲基亚磺磺酸钠和甲基磺酸酯反应机理 10+3 kaobao456 2026-03-29 4/200 2026-03-30 23:16 by nBu锂
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
信息提示
请填处理意见