应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆未知基因。有这方面经验的战友帮助下。
91/1返回列表
查看: 1505  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆未知基因。有这方面经验的战友帮助下。

我要克隆一个鱼的未知基因。我有以下疑问：1，我克隆鱼的一个未知基因。我该找多少生物的该基因来比对找保守区。因为鱼类的比较少，就两种鱼NCBI里面有Sequence，还是预测的，我不得不找人类，小鼠等哺乳动物的该基因来补上。同源性还是有80%的。可以吧？一共能凑齐七八种，不知道够不够？2，简并引物设计5对够不够？3，PCR条件是按常规的还是自己优化一下比较好哦？4.从开始到拿到基因全长抓紧时间的话要多久？谢谢解答，谢谢哦。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验操作

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-06 16:40:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghs25372216

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流！ 2012-08-06 20:17:45
fengyunqb: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-08-07 18:58:31
fengyunqb: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-08-08 09:13:34
本帖内容被屏蔽
2楼2012-08-06 17:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流！ 2012-08-06 20:17:54
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-07 18:58:45
单纯克隆个基因，用7，8个鱼的序列比对用保守区设计引物是可以的。
克隆未知基因，楼主是否知道这个基因控制什么性状啊，以及为什么要克隆这个基因呢？是想克隆出来验证其功能嘛？其次，还需要该基因是否是多基因家族，否则克隆出来也无法确定是否就是你需要的基因哈。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-08-06 18:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这方面的知识我也会刚刚涉猎，学习一下
赞一下(1人) 回复此楼
事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
4楼2012-08-06 20:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小微生物

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★有帮助 2012-08-07 18:58:59
5对差不多了  我们实验室就是用5对，优化一下不错，时间嘛 要看运气喽
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-08-07 07:56:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hualelele33

新虫 (初入文坛)
用电子克隆，拼接的方法也可以的
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-08 10:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
7楼2012-08-08 20:03:59
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

光树林

木虫 (著名写手)
表示2楼很强大，佩服！
赞一下(1人) 回复此楼
一路向北
8楼2012-08-08 20:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)
前面的网友提过了，同源性是定性描述，不是定量描述的，但是很多杂志都在这个概念上出错。先找亲缘物种的对应蛋白质序列来比对，再设计简并引物。常用的设计简并引物的程序如CODEHOP程序，我用过，很好用。通过简并PCR得到部分片段后，再通过适当的PCR Walking克隆两端的旁邻序列，获得全长序列，比如TAIL PCR, SiteFinding PCR等。
赞一下 回复此楼
9楼2012-08-09 19:28:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyunqb 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601求调剂 +3 Du.11 2026-03-16 3/150 2026-03-16 20:42 by 无际的草原
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 6/300 2026-03-16 19:38 by z1z2z3879
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 求调剂，一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭