应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆未知基因。有这方面经验的战友帮助下。
91/1返回列表
查看: 1504  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆未知基因。有这方面经验的战友帮助下。

我要克隆一个鱼的未知基因。我有以下疑问：1，我克隆鱼的一个未知基因。我该找多少生物的该基因来比对找保守区。因为鱼类的比较少，就两种鱼NCBI里面有Sequence，还是预测的，我不得不找人类，小鼠等哺乳动物的该基因来补上。同源性还是有80%的。可以吧？一共能凑齐七八种，不知道够不够？2，简并引物设计5对够不够？3，PCR条件是按常规的还是自己优化一下比较好哦？4.从开始到拿到基因全长抓紧时间的话要多久？谢谢解答，谢谢哦。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验操作

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-06 16:40:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghs25372216

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流！ 2012-08-06 20:17:45
fengyunqb: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-08-07 18:58:31
fengyunqb: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-08-08 09:13:34
本帖内容被屏蔽
2楼2012-08-06 17:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流！ 2012-08-06 20:17:54
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-07 18:58:45
单纯克隆个基因，用7，8个鱼的序列比对用保守区设计引物是可以的。
克隆未知基因，楼主是否知道这个基因控制什么性状啊，以及为什么要克隆这个基因呢？是想克隆出来验证其功能嘛？其次，还需要该基因是否是多基因家族，否则克隆出来也无法确定是否就是你需要的基因哈。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-08-06 18:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这方面的知识我也会刚刚涉猎，学习一下
赞一下(1人) 回复此楼
事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
4楼2012-08-06 20:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小微生物

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★有帮助 2012-08-07 18:58:59
5对差不多了  我们实验室就是用5对，优化一下不错，时间嘛 要看运气喽
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-08-07 07:56:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hualelele33

新虫 (初入文坛)
用电子克隆，拼接的方法也可以的
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-08 10:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
7楼2012-08-08 20:03:59
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

光树林

木虫 (著名写手)
表示2楼很强大，佩服！
赞一下(1人) 回复此楼
一路向北
8楼2012-08-08 20:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)
前面的网友提过了，同源性是定性描述，不是定量描述的，但是很多杂志都在这个概念上出错。先找亲缘物种的对应蛋白质序列来比对，再设计简并引物。常用的设计简并引物的程序如CODEHOP程序，我用过，很好用。通过简并PCR得到部分片段后，再通过适当的PCR Walking克隆两端的旁邻序列，获得全长序列，比如TAIL PCR, SiteFinding PCR等。
赞一下 回复此楼
9楼2012-08-09 19:28:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyunqb 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 求调剂，药学 +3 归零lbm 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:21 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭