24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1537  |  回复: 8

fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆未知基因。有这方面经验的战友帮助下。

我要克隆一个鱼的未知基因。我有以下疑问:1,我克隆鱼的一个未知基因。我该找多少生物的该基因来比对找保守区。因为鱼类的比较少,就两种鱼NCBI里面有Sequence,还是预测的,我不得不找人类,小鼠等哺乳动物的该基因来补上。同源性还是有80%的。可以吧?一共能凑齐七八种,不知道够不够?2,简并引物设计5对够不够?3,PCR条件是按常规的还是自己优化一下比较好哦?4.从开始到拿到基因全长抓紧时间的话要多久?谢谢解答,谢谢哦。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验操作

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghs25372216

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流! 2012-08-06 20:17:45
fengyunqb: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-08-07 18:58:31
fengyunqb: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-08-08 09:13:34
本帖内容被屏蔽

2楼2012-08-06 17:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流! 2012-08-06 20:17:54
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-07 18:58:45
单纯克隆个基因,用7,8个鱼的序列比对用保守区设计引物是可以的。
克隆未知基因,楼主是否知道这个基因控制什么性状啊,以及为什么要克隆这个基因呢?是想克隆出来验证其功能嘛?其次,还需要该基因是否是多基因家族,否则克隆出来也无法确定是否就是你需要的基因哈。
3楼2012-08-06 18:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这方面的知识我也会刚刚涉猎,学习一下
事实证明,除了你自己,不要指望任何一个人
4楼2012-08-06 20:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小微生物

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, 有帮助 2012-08-07 18:58:59
5对差不多了  我们实验室就是用5对,优化一下不错,时间嘛 要看运气喽
5楼2012-08-07 07:56:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hualelele33

新虫 (初入文坛)

用电子克隆,拼接的方法也可以的
6楼2012-08-08 10:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
7楼2012-08-08 20:03:59
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

光树林

木虫 (著名写手)

表示2楼很强大,佩服!
一路向北
8楼2012-08-08 20:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)

前面的网友提过了,同源性是定性描述,不是定量描述的,但是很多杂志都在这个概念上出错。先找亲缘物种的对应蛋白质序列来比对,再设计简并引物。常用的设计简并引物的程序如CODEHOP程序,我用过,很好用。通过简并PCR得到部分片段后,再通过适当的PCR Walking克隆两端的旁邻序列,获得全长序列,比如TAIL PCR, SiteFinding PCR等。
9楼2012-08-09 19:28:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyunqb 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学 +10 妮妮ninicgb 2026-03-27 10/500 2026-03-28 14:07 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 一志愿郑大085600,310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 材料学硕333求调剂 +8 北道巷 2026-03-24 8/400 2026-03-27 10:18 by 我是小康
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
信息提示
请填处理意见