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fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆未知基因。有这方面经验的战友帮助下。

我要克隆一个鱼的未知基因。我有以下疑问:1,我克隆鱼的一个未知基因。我该找多少生物的该基因来比对找保守区。因为鱼类的比较少,就两种鱼NCBI里面有Sequence,还是预测的,我不得不找人类,小鼠等哺乳动物的该基因来补上。同源性还是有80%的。可以吧?一共能凑齐七八种,不知道够不够?2,简并引物设计5对够不够?3,PCR条件是按常规的还是自己优化一下比较好哦?4.从开始到拿到基因全长抓紧时间的话要多久?谢谢解答,谢谢哦。
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小小微生物

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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fengyunqb: 金币+1, 有帮助 2012-08-07 18:58:59
5对差不多了  我们实验室就是用5对,优化一下不错,时间嘛 要看运气喽
5楼2012-08-07 07:56:05
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