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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 昆虫DNA提取，没结果啊！
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西区五号楼

新虫 (小有名气)

[求助] 昆虫DNA提取，没结果啊！

用CTAB法提取一种虫子的DNA，结果好干净啊！除了MARKER什么都看不到啊！已经不是第一次这样了啊！但是没有DNA的做PCR却是有结果的，这是闹哪样啊！用异丙醇醇沉是不是不对啊？还是我抽提的次数过多了呢？
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1楼 2012-08-01 10:38:01
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立志美丽

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以换DNA试剂盒试试
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2楼2012-08-01 11:18:30
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-01 14:04:00
你自己提取的话，很多试剂都是自己配制的，有时候不一定是哪个试剂出问题，所以建议你把所有试剂换一下，或者你要是嫌麻烦的话，就换嫌疑最大的试剂，我以前做过CTAB提DNA，有一次就是因为TE buffer的pH出问题导致实验做不出来；或者你直接去买试剂盒得了，方便还便宜，省事；做PCR的时候可以考虑加阴性对照
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3楼2012-08-01 11:23:35
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西区五号楼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 立志美丽 at 2012-08-01 11:18:30
可以换DNA试剂盒试试

换哪种的呢？一般都是用什么试剂盒啊？谢谢喽！
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4楼2012-08-01 14:05:00
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西区五号楼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-01 11:23:35
你自己提取的话，很多试剂都是自己配制的，有时候不一定是哪个试剂出问题，所以建议你把所有试剂换一下，或者你要是嫌麻烦的话，就换嫌疑最大的试剂，我以前做过CTAB提DNA，有一次就是因为TE buffer的pH出问题导致实 ...

嗯，我也想用试剂盒~请教一下：我的目的其实是做线粒体基因组，我是不是可以用提质粒的试剂盒呢？
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5楼2012-08-01 14:06:08
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西区五号楼: 金币+3, ★有帮助 2012-08-01 21:22:54
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-02 15:26:47
不可以的，我感觉，我以前做过mtDNA，都是直接提取基因组，虽然它是环状，具体我没试过，你可以试试，但还是建议你先按部就班的来，等出了好的结果之后再去实现你的新想法
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6楼2012-08-01 16:17:22
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ZOEY21

金虫 (小有名气)
★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-02 15:27:08
楼主你意思是电泳看不到DNA条带，但是PCR结果跑电泳能看到条带是吗？如果这样，我建议，PCR设阴性对照，如果阴性对照没有条带而目的样品出现条带那应该没什么好担心的。因为琼脂糖电泳毕竟没那么精确，很可能手提DNA量太少，在紫外下看不出来但能PCR出条带。但你如果一定要在文章里要一张DNA的电泳图，那...
BTW我的经验，试剂盒提取DNA质量较手提纯但浓度更低
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7楼2012-08-02 08:49:22
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ximenzoe

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
难道是蛋白太多，CTAB没提出来，试一下蛋白酶K法？
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8楼2012-08-02 17:53:19
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西区五号楼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ximenzoe at 2012-08-02 17:53:19
难道是蛋白太多，CTAB没提出来，试一下蛋白酶K法？

在改变了一些相应的抽屉步骤后，终于提出来了。
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9楼2012-08-05 09:08:32
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