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...山雨

新虫 (初入文坛)

[求助] 昆虫基因组提取

昆虫基因组浓缩与纯化：               
1. 将样品置于 1.5 mL 离心管中，在每一样品中加入等体积的酚/氯仿/异戊醇溶液，将管中样品振荡混合成乳状液体；
2. 室温下，12000 r/min 离心 1 min；
3. 吸取上层水相层到另一洁净的离心管中，再次加入等体积的酚/氯仿/异戊醇溶液，混匀，室温下 12000 r/mi n离心 1 min；
4. 吸取上层水相转移到另一洁净离心管中，加入等体积的水饱和乙醚，混匀，静置 5 min 待有机相与水相分层，弃上清乙醚；
5. 置于 68℃温育 10 min，不时用手指弹动管壁，使乙醚充分挥发；
6. 加入 1/10 体积的乙酸钠溶液（3 mol/L，pH5.2），上下颠倒离心管使溶液充分混匀；
7. 准确加入 2 倍体积的预冷的无水乙醇，上下颠倒混匀，-20℃静置 1 h使 DNA 充分沉淀；
8. 4℃，12000 r/min 离心 10 min，弃上清；
9. 加入 70% 预冷的乙醇至管中 2/3 体积，混匀漂洗以去除残余的盐，高速离心（4℃，12000 r/min，5 min），弃尽上清；
10. 室温放置 15 min 左右，使乙醇完全挥发，加入适当体积的双蒸水或 TE 溶液重溶 DNA 沉淀。

请问：步骤中加入乙醚的具体作用？这步可以省略吗？
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1楼 2013-05-24 21:28:00
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11101

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
...山雨: 金币+3, ★有帮助 2013-10-29 10:57:19
...山雨: 金币+2 2013-10-29 10:57:46
本人觉得应该可以省略，因为我平时做实验时也没有用到乙醚
赞一下 回复此楼
相信自己！
2楼2013-06-02 23:47:03
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...山雨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 11101 at 2013-06-02 23:47:03
本人觉得应该可以省略，因为我平时做实验时也没有用到乙醚

好吧，谢谢
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3楼2013-06-11 11:05:37
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refreshing11

新虫 (正式写手)
乙醚作为有机溶剂，主要溶解油类和脂类物质，而你之前用的酚也有这个作用，因此，这里可以不用乙醚了吧，
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-04 14:53:19
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