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...山雨

新虫 (初入文坛)

[求助] 昆虫基因组提取

昆虫基因组浓缩与纯化:               
1. 将样品置于 1.5 mL 离心管中,在每一样品中加入等体积的酚/氯仿/异戊醇溶液,将管中样品振荡混合成乳状液体;
2. 室温下,12000 r/min 离心 1 min;
3. 吸取上层水相层到另一洁净的离心管中,再次加入等体积的酚/氯仿/异戊醇溶液,混匀,室温下 12000 r/mi n离心 1 min;
4. 吸取上层水相转移到另一洁净离心管中,加入等体积的水饱和乙醚,混匀,静置 5 min 待有机相与水相分层,弃上清乙醚;
5. 置于 68℃温育 10 min,不时用手指弹动管壁,使乙醚充分挥发;
6. 加入 1/10 体积的乙酸钠溶液(3 mol/L,pH5.2),上下颠倒离心管使溶液充分混匀;
7. 准确加入 2 倍体积的预冷的无水乙醇,上下颠倒混匀,-20℃静置 1 h使 DNA 充分沉淀;
8. 4℃,12000 r/min 离心 10 min,弃上清;
9. 加入 70% 预冷的乙醇至管中 2/3 体积,混匀漂洗以去除残余的盐,高速离心(4℃,12000 r/min,5 min),弃尽上清;
10. 室温放置 15 min 左右,使乙醇完全挥发,加入适当体积的双蒸水或 TE 溶液重溶 DNA 沉淀。

请问:步骤中加入乙醚的具体作用?这步可以省略吗?
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refreshing11

新虫 (正式写手)

乙醚作为有机溶剂,主要溶解油类和脂类物质,而你之前用的酚也有这个作用,因此,这里可以不用乙醚了吧,
4楼2013-07-04 14:53:19
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11101

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
...山雨: 金币+3, 有帮助 2013-10-29 10:57:19
...山雨: 金币+2 2013-10-29 10:57:46
本人觉得应该可以省略,因为我平时做实验时也没有用到乙醚
相信自己!
2楼2013-06-02 23:47:03
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...山雨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 11101 at 2013-06-02 23:47:03
本人觉得应该可以省略,因为我平时做实验时也没有用到乙醚

好吧,谢谢
3楼2013-06-11 11:05:37
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