应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液PCR出现杂带是什么原因？
181/2返回列表12下一页
查看: 4145  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

skuy1223

金虫 (小有名气)

[求助] 菌液PCR出现杂带是什么原因？ 已有2人参与

我扩增的目的基因大概180bp的大小，扩全长、胶回收直到菌液PCR该位置都有明亮的条带。但是同时也一直出现一个问题，那就是在靠近400bp（大概380bp左右）的位置也同样出现了较暗，但是也明显的条带。这个问题在胶回收的时候我已经发现了，本来我以为是因为胶切的不好。但是挑了单克隆之后，做菌液PCR那个位置居然又出现了很暗的条带（当然180bp有明亮的带）。这个时候我就不淡定了……不知有没有哪位高手有没有遇到过类似的情况？有的话敬请指点具体是什么原因、对后续的蛋白表达是否有影响？感激不尽！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力！
1楼 2012-07-29 19:06:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)
各位请多多指教啊！！
赞一下 回复此楼
努力！
2楼2012-07-29 19:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thunder00

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是引物和模板错配，菌液Pcr和酶切鉴定都只是初步鉴定，你提重组质粒测序没问题就可以。
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-29 21:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishu杯子

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是引物二聚体呢？
可以适当减少引物量看看
赞一下 回复此楼
快乐源于生活!!
4楼2012-07-30 07:51:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

healy13

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-30 13:44:01
skuy1223: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2012-07-30 20:57:28
本帖内容被屏蔽
5楼2012-07-30 09:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-30 13:44:09
skuy1223: 金币+1, ★有帮助, 希望如此 2012-07-30 20:57:45
这个，我没遇到过。
我觉得只要不影响你的质粒序列，不影响转化，对你最终蛋白表达是没问题的，毕竟前期这些步骤只是构建，只是初步检验。
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-30 09:50:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

斯多格格

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我遇到过，但是重做一次又没有了，你重复没有？每次都这样么？
赞一下 回复此楼
书自香我何须花
7楼2012-07-30 09:56:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，用你的菌液提质粒，然后进行单、双酶切，跑个胶就清楚了，一定加个MARKER。
赞一下 回复此楼
8楼2012-07-30 12:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 斯多格格 at 2012-07-30 09:56:40
我遇到过，但是重做一次又没有了，你重复没有？每次都这样么？

只是想先搞清楚是什么原因……
赞一下 回复此楼
努力！
9楼2012-07-30 20:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-30 09:50:36
这个，我没遇到过。
我觉得只要不影响你的质粒序列，不影响转化，对你最终蛋白表达是没问题的，毕竟前期这些步骤只是构建，只是初步检验。

希望如此！谢谢！
回复此楼
努力！
10楼2012-07-30 20:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 skuy1223 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭