24小时热门版块排行榜    

查看: 4137  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

skuy1223

金虫 (小有名气)

[求助] 菌液PCR出现杂带是什么原因? 已有2人参与

我扩增的目的基因大概180bp的大小,扩全长、胶回收直到菌液PCR该位置都有明亮的条带。但是同时也一直出现一个问题,那就是在靠近400bp(大概380bp左右)的位置也同样出现了较暗,但是也明显的条带。这个问题在胶回收的时候我已经发现了,本来我以为是因为胶切的不好。但是挑了单克隆之后,做菌液PCR那个位置居然又出现了很暗的条带(当然180bp有明亮的带)。这个时候我就不淡定了……不知有没有哪位高手有没有遇到过类似的情况?有的话敬请指点具体是什么原因、对后续的蛋白表达是否有影响?感激不尽!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

努力!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-30 13:44:09
skuy1223: 金币+1, 有帮助, 希望如此 2012-07-30 20:57:45
这个,我没遇到过。
我觉得只要不影响你的质粒序列,不影响转化,对你最终蛋白表达是没问题的,毕竟前期这些步骤只是构建,只是初步检验。
6楼2012-07-30 09:50:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

skuy1223

金虫 (小有名气)

各位请多多指教啊!!
努力!
2楼2012-07-29 19:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thunder00

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是引物和模板错配,菌液Pcr和酶切鉴定都只是初步鉴定,你提重组质粒测序没问题就可以。
3楼2012-07-29 21:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishu杯子

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是引物二聚体呢?
可以适当减少引物量看看
快乐源于生活!!
4楼2012-07-30 07:51:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +10 Kittylucky 2026-08-27 10/500 2026-08-28 07:10 by sincosx
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+3 winsaint 2026-08-27 7/350 2026-08-28 07:06 by hejicker
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金不中,共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
请填处理意见