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lpsyz007

新虫 (小有名气)

[求助] PCR反应体系求助

本科菜鸟PCR个人用的的是20（单位微升）的体系大概是BUFFER 2.0 dNTPs 0.4 Tap 0.4 正反引物 2 模板DNA 1.2 水 14.这是我用的 最后老师说这个体系做不出，我看了一下老师的体系BUFFER 2.0 dNTPs 0.3 Tap 0.5 正反引物 2 模板DNA 2 水 13.2.求高手给个解释啊！！！！！我的体系是什么问题？？？
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1楼 2012-07-16 10:23:21
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-07-18 13:48:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by lpsyz007 at 2012-07-16 20:35:47
dNTPs和Tap的量比如有什么比例之类的 还有就是正反引物和模板DNA要一样？？这是为什么呢？...

引物并不是要和模版一样，这个只能说是你的体系刚好一样。另外2着也没有太多的关系，主要的是酶和dNTP够用就好，当然浓度也不能太大。PCR体系是要靠自己摸索的，而不是单纯的去做自己或别人（即使是老师）给的体系。
实验都是要靠自己去探索，不要过于的纠结别人的条件。根据自己的实验结果再交流讨论优化PCR体系和条件就好。
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lpsyz007
6楼2012-07-17 09:12:15
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