应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？
21/1返回列表
查看: 2608  |  回复: 10
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

qiannianchao

金虫 (初入文坛)

[求助] SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？

引物12:1000bp左右；
引物34:500bp左右；
重叠部分长度：40bp左右；
反应条件：50-52℃退火45s，延伸7min，一开始10-15个循环，然后加了1和4引物，30-40个循环；
得到的电泳结果总是：出现非特异性条带，大小600bp左右，而且很亮！但是目的条带处却很暗，无法回收。
请教高手这种情况是什么原因造成的，需要怎么样改善，在线等待。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-06 14:42:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 19:01:10
你是先进行10－15个循环以后再加上1和4引物的吗？这种没有做过，我们平时做的都是先分别将这两段产物P出来，纯化后按1：1比例混合作模板，再用全长的引物扩增，没有出现过你说的那种情况。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-06 16:49:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qiannianchao 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭