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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？
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qiannianchao

金虫 (初入文坛)

[求助] SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？

引物12:1000bp左右；
引物34:500bp左右；
重叠部分长度：40bp左右；
反应条件：50-52℃退火45s，延伸7min，一开始10-15个循环，然后加了1和4引物，30-40个循环；
得到的电泳结果总是：出现非特异性条带，大小600bp左右，而且很亮！但是目的条带处却很暗，无法回收。
请教高手这种情况是什么原因造成的，需要怎么样改善，在线等待。。
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1楼 2012-06-06 14:42:09
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qsx04152006

木虫 (知名作家)
楼主给个联系方式啊，好向你请教soepcr怎么设计引物啊，具体怎么连接啊？
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9楼2013-09-02 12:56:50
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qsx04152006

木虫 (知名作家)
请问：soepcr怎么设计引物啊，基因1和基因2各设计两个引物a、b和c、d，其中b引物右端是含有基因2 的引物还是含有基因2的5“端序列，同理，引物C 5”端是含有基因1的下游引物还是含有基因1的序列？谢谢。
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10楼2013-09-02 13:04:01
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qsx04152006

木虫 (知名作家)
引物12:1000bp左右；
引物34:500bp左右；1000和500指的是目的基因吧，不是引物长度吧
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11楼2013-09-02 13:07:43
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