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[交流]
神奇的质粒提取，花儿一样神奇的单酶切跑胶！
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引言：本人小硕，开始做构建，从实验组其他同学那里要来pcDNA3.1(+)做真核表达载体，一开始酶切就遇到了问题，特来请教！感谢大家指教！ 下图为用同学给的pcDNA3.1(+)转化DH5α之后，手提质粒、试剂盒提质粒、3种酶单酶切试剂盒提取质粒的1%琼脂糖电泳图  M: takara的DL 10,000 Marker 1. BamHⅠ单酶切 2. HindⅢ单酶切 3. XhoⅠ单酶切 4. takara试剂盒提取的质粒 5. 碱裂解法酚氯仿抽提的质粒 6. 同学给的质粒pcDNA3.1(+) 单酶切条件为：17ul试剂盒提取的质粒+1ul酶+2ul K Buffer 共20ul体系，37℃水浴4小时 单酶切都切成花朵了，哈哈，不知道有人遇到这个问题没！！！ 请教大家这到底是怎么回事？好像同学给的质粒跑胶条带也有问题，怎么两条亮带呢。。。应该不是mRNA，在冰箱放很久了。 下图是试剂盒提取的质粒和手提质粒pcDNA3.1(+)  123为试剂盒提取，456为碱裂解法酚氯仿抽提  |
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24楼2012-06-01 14:14:22
重新切了5ul质粒 条件不变 貌似依然没切完
25楼2012-06-01 20:09:29
26楼2012-06-01 22:49:21
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