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蛋白之家

新虫 (小有名气)

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[交流] 关于酶切后的连接问题，共同探讨共同进步

各位大侠
为什么酶切切下来也能回收上，就是回收的时候浓度小，但连了好多次都连不上啊试过4:1 ，3:1的比例，不是说连接的时候3:1的比例是最好的么为什么连不上啊很纠结
希望各位大侠前来帮忙，谢谢!

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1楼 2012-05-29 15:05:57

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蓝心1728

木虫 (小有名气)

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

可以试试看
你可以尝试7:1的比例，如目的片段（12ng/ul ）8微升+载体（17.5ng/ul ）0.8微升；11:1的比例，如如目的片段（12ng/ul ）8微升+载体（17.5ng/ul ）0.5微升
也可以自己调整几个浓度，试试。另外你的感受态效率怎么样？一般连接产物转化时，感受态效率至少10的六次方以上，否则不容易筛选的到