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蛋白之家

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[交流] 关于酶切后的连接问题，共同探讨共同进步

各位大侠
为什么酶切切下来也能回收上，就是回收的时候浓度小，但连了好多次都连不上啊试过4:1 ，3:1的比例，不是说连接的时候3:1的比例是最好的么为什么连不上啊很纠结
希望各位大侠前来帮忙，谢谢!

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1楼 2012-05-29 15:05:57

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引用回帖:

16楼: Originally posted by 蓝心1728 at 2012-06-01 14:55:16
1、连接酶本身是否好用，问问其他老师或同学有没有用过同一管的连接酶能否连上，试试其他牌子的酶
2、比列是按质量比，DNA目的片段：载体=7:1~10:1之间，一般目的片段要多一些，例如，7:1的话，取目的片段（44.5ng ...

我酶切之后回收的目的片段的浓度才12ng/ul 载体一个是43 一个是17.5ng/ul 这样也可以做连接吗？这是我做的酶切之后回收最好的一次浓度了