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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 谁用过Fermentas的T4连接酶？
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da_da

金虫 (小有名气)

[交流] 谁用过Fermentas的T4连接酶？

谁用过Fermentas的T4连接酶啊？我连的是粘性末端，说明书上说22度10min中就行，我把时间延长到了2h，也连不上，怎么回事？大家都用的什么条件啊
注：目的片段和载体都切开了，感受态也没有问题。
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1楼 2012-05-17 10:07:37
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da_da

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by snzydong at 2012-05-17 15:26:48:
22 度 可以延长一点时间 10min也没有问题 我以前都是这么做的 可以延长2小时 酶量 20ul加0.2ul 如果连10min 20ul可以加2ul

是不是我的片段太大了啊，一个2500bp，一个1500bp，我用的都是20UL体系，加1.1ul酶，取10ul转化
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10楼2012-05-17 18:58:06
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lillian菲

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们一般是室温过夜酶连，或者在37度2小时，你可以试试
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3楼2012-05-17 11:28:22
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真心话

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
da_da: 金币+1 2012-05-17 18:56:27
我们都是16℃过夜连接，效果还是不错的。
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4楼2012-05-17 12:52:26
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da_da

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 真心话 at 2012-05-17 12:52:26:
我们都是16℃过夜连接，效果还是不错的。

是fermentas的酶吗
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5楼2012-05-17 13:24:02
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